OCI-Ly19细胞操作步骤

OCI-Ly19细胞操作步骤

OCI-LY19是一种人B细胞淋巴瘤细胞系，源自弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者的外周血单核细胞。 该细胞系常用于研究B细胞恶性肿瘤的分子机制、药物敏感性及耐药性，广泛应用于癌症生物学、免疫治疗和靶向药物开发等领域的研究。 1987年从一个患有B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）（弥漫性大细胞淋巴瘤，DLCL，4B期，复发时）的27岁女性的骨髓中建立。

OCI-Ly19细胞出库图：

随货提供STR鉴定报告、支原体阴性检测报告以及说明书等
悬浮细胞接收注意事项 ：1.悬浮细胞经过快递运输，会出现细胞皱缩和死细胞碎片等情况，收到时先放培养箱静置4小时以上，2.将瓶内全部培养基吸至离心管内离心收集，3.使用5-6ml新鲜培养基重悬细胞沉淀后接种T25培养瓶中继续培养。

接种后把培养瓶平放显微镜下静置10分钟后观察密度和状态，拍照反馈到销售，根据图片可以给出接下来的处理建议（传代或者换液）

悬浮细胞传代：
如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。                                        方法一：将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加新鲜培养液后重悬混匀按1：2的比例分到 新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力。                                                                                 方法二：1) 半换液处理，竖着培养瓶静置 10-20min 左右，肉眼可见大部分细胞沉在底部；                                                                                                                              2) 轻轻吸掉 3ml 左右培养基，将剩余细胞悬起混匀；                                                   3) 将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 6-8 mL 培养基的培养皿中或者培养瓶中，一般这样传代 3 次左右可以离心传代一次。                                                                                            注意：使用试剂需要提前37度复温，避免细胞遇冷受刺激皱缩。

后续处理建议：悬浮细胞状态在无碎片无黑点的情况下无需换液，观察培养基偏黄及时进行补液2ml左右，当细胞出现分泌物可以使用半换液法处理。