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大鼠Flt-3配体(Flt-3 ligand)ELISA试剂盒

  • 产品型号:
  • 产品时间:2017-11-23
  • 简要描述:上海慧颖生物科技专业供应大鼠Flt-3配体(Flt-3 ligand)ELISA试剂盒,我们专业生产研发经营稳定、优质、高效、实用的ELISA试剂盒,公司提供ELISA试剂盒免费代测,ELISA试剂盒批发价零售,ELISA试剂盒专业生产厂家,ELISA试剂盒进口品牌!
  • 产品简介

             大鼠Flt-3配体(Flt-3 ligand)ELISA试剂盒  

检测原理

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Flt-3 Ligand 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Flt-3 Ligand与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Flt-3 Ligand,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,zui后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,Flt-3 Ligand浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Flt-3 Ligand浓度。

试剂盒组成2-8℃保存)

酶标板(Coated Wells)

96孔

酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate)

12ml

10×标本稀释液(Sample Buffer)

12ml

20×浓缩洗涤液(Wash Buffer)

50ml

标准品(Standards):20ng/瓶

2瓶

底物工作液(TMB Solution)

12ml

*抗体工作液(Biotinylated Antibody)

12ml

终止液(Stop Solution)

12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反复冻融。

2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成20ng/ml的溶液。设标准管8管,*管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在*管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。

4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)

检测程序

1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。

3. 每孔中加入*抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

4. 洗板:同前。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。

6. 洗板:同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗处反应15分钟。

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。

2. 以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0 pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Flt-3 Ligand含量。

试剂盒性能

1. 灵敏度:zui小的Flt-3 Ligand 检测浓度小于15pg/ml。

2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠Flt-3 Ligand。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

3. 重复性:板内、板见变异系数均小于10%。

大鼠Flt-3配体(Flt-3 ligand)ELISA试剂盒

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。

2. 洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。

3. 板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

5. 本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!

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