ATT-20细胞系

ATT-20细胞系

准备工作

准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试等。

取材

在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。

培养

将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。

正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的PH 是否太酸或太碱（由酚红指示剂指示），此外对培养温度和CO2 浓度也要定时检查。

一般原代培养进入培养后有一段潜伏期（数小时到数十天不等），在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质，也可能仅有不死性（Immortality）而无恶性。培养正在生长中的细胞是进行各种生物医学实验的良好材料。

冻存及复苏

为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，zui终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。

复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。

冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。

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HS77人小细胞肺癌

HSC人雪旺细胞

HSC-T6大鼠肝星形细胞

HT-1080人纤维肉瘤

HT29人结肠癌细胞系

HuH-6人肝母细胞瘤细胞

HUH-7人肝癌细胞

HuT 78人T淋巴细胞白血病细胞

Hut102人皮肤T细胞淋巴瘤

HUVEC- C人脐静脉血管内皮原代细胞

HUVEC-C人脐静脉血管内皮细胞株

IEC-18大鼠回肠细胞

IMR-32人神经母细胞瘤细胞

INS-1大鼠胰岛瘤细胞

Ishikeuva人子宫内膜癌细胞

J558L鼠骨髓瘤

J82人膀胱移行细胞癌

JAR人胎盘绒毛癌细胞

JEC人子宫内膜腺癌细胞

JEG 人绒癌细胞

JEG-3人绒毛膜癌细胞

JeKo-1人套细胞淋巴瘤细胞

Jurkat人急性T细胞白血病

Jurkat, Clone E6-1人T淋巴细胞白血病细胞

K562 人慢性髓原白血病细胞

K7M2-WT小鼠骨肉瘤成骨细胞

KB人口腔表皮样癌细胞

KG1a人髓系白血病细胞

KM-12人大肠癌细胞

KM202L人卵巢癌细胞

KP1人胰腺癌细胞

KP2人胰腺癌细胞

KP3人胰腺癌细胞

KP4人胰腺癌细胞

KP-N-NS人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)

KU812人外周血嗜碱性白血病细胞

KURAMOCHI人卵巢癌细胞

kyse-140人食管癌细胞

Kyse450人食管癌细胞

KYSE-510人食管癌细胞

L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞

L-02人正常肝细胞

L1210小鼠白血病细胞

L5178Y 小鼠淋巴瘤细胞

L6大鼠成肌细胞

L6565小鼠白血病克隆细胞系

L78人肺腺鳞癌细胞

L929小鼠成纤维细胞

LAX人肺腺癌

Lec1仓鼠卵巢细胞

LECPα-1 人肺癌细胞

Lewis小鼠肺癌细胞

Li-7人肝癌细胞

LLC小鼠肺癌细胞

LLC-MK2恒河猴肾细胞

lncap人前列腺癌细胞

LNCaP clone FGC人前列腺癌细胞

LO2人正常肝细胞

LoVo人结肠癌细胞

LS-174-T人结肠腺癌细胞

LTEP-A2人肺腺癌

LX-2人肝星形细胞

MA-104恒河猴肾细胞

MC3T3-E1小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14

MC3T3-E1 Subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14

MCF-10A人正常乳腺上皮细胞

MCF7 人乳腺癌细胞

MDA-MB-231人乳腺腺癌

MDA-MB-415人乳腺腺癌细胞

MDA-MB-435人乳腺癌高转移细胞

MDA-MB-435S人乳腺导管癌

MDA-MB-436人乳腺腺癌细胞

MDA-MB-453人乳腺癌细胞

MDA-MB-468人乳腺癌细胞

MDBK (NBL-1)牛肾细胞

MDCK狗肾细胞

MDCK(NBL-2)狗肾细胞

ME12人前列腺癌

ME-180人子宫颈表皮癌细胞

MEF小鼠胚胎成纤维细胞

MFC小鼠胃癌细胞

MG-63人骨头肉瘤细胞

MGC80-3人胃癌细胞

MHCC97-H高转移人肝癌细胞

Miapaca2人胰腺癌细胞

MKN-28人胃癌细胞

MKN-45人胃癌细胞

MLTC-1小鼠睾丸间质细胞瘤细胞

MNK-7人乳癌

MNNG/HOS Cl人骨肉瘤细胞

MOLT-4人急性淋巴母细胞白血病细胞

MR1中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤

MRC-5人胚肺细胞

MS1小鼠胰岛内皮细胞

MS751人子宫颈表皮癌细胞

MSTO-211H人肺癌细胞株

Mv.1.Lu(NBL-7)貂肺上皮细胞

NAMALWA人Burkitt's淋巴瘤细胞

NCI-H1299人非小细胞肺癌细胞

NCI-H1395人肺腺癌细胞

NCI-H1650人非小细胞肺癌细胞

NCI-H1975人肺腺癌细胞

NCI-H2452人间皮瘤细胞

NCI-H292人肺癌细胞(淋巴结转移)

NCI-H358人非小细胞肺癌细胞

NCI-H446人小细胞肺癌细胞

NCI-H460人大细胞肺癌细胞

NCI-H661人大细胞肺癌细胞

NCI-H716人结直肠腺癌细胞

NCI-N87人胃癌细胞

NCTC clone 929小鼠成纤维细胞

Neuro-2a小鼠脑神经瘤细胞

NIH/3T3小鼠胚胎细胞

NIH-3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪)

NIT-1β小鼠胰岛素瘤β细胞

NP69人永生化鼻咽上皮细胞系

NR8383大鼠肺泡巨噬细胞

NRC-5人胚肺

NRK大鼠肾细胞

NRK-52E大鼠肾细胞

OC3人卵巢癌细胞株

OK负鼠肾细胞

OKT 11杂交瘤细胞抗CD2

OKT 3杂交瘤(抗CD3)

OP9小鼠骨髓基质细胞

OS-RC-2人肾癌细胞

OV56人卵巢癌细胞

OV90人卵巢癌细胞

OVCAR3人卵巢癌细胞

OVCAR4人卵巢癌细胞

OVISE人卵巢癌细胞

OVSAHO人卵巢癌细胞

OVTOKO人卵巢癌细胞

P19小鼠畸胎瘤细胞

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]小鼠骨髓瘤细胞

P388小鼠淋巴样瘤

P388D1小鼠淋巴样瘤细胞

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞

P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞h+急淋白血病细胞系