常用菌种管理和保藏方法

菌种需有专人保管，管理人员应具有较强的责任心，并具有一定的微生物专业知识和技术水平。

菌种应保存在冰箱内，保存菌种的冰箱不得放置食品及易挥发性药品。

按期有专人根据操作规程进行传代接种。

保存菌种应定期检查，一般每年检查1—2次，发现染菌变异等现象时，报告科室主任研究处理。

菌种的来源、复壮、使用和鉴定等均应做好详细记录。

试验菌种不得任意带出菌种保存实验室。外单位索取菌种时，应包装严密，妥善保存。

菌种检查和复壮

    经过长期保藏和传代的菌种，由于种种原因易发生衰退、变异或死亡，因此各类菌种在保藏期间必须定期检查，发现变异或衰退，应及时给予恢复。

1.定期检查

在一定间隔时间需重新复活、分离、纯化、鉴定再保藏。

检查项目：菌落形态、革兰染色、显微镜下菌体形态、生化特性及血清学检查。

2. 防止菌落的衰退

控制传代次数。

创造适宜的培养条件。

用不同类型的细胞进行传代。

采用有效的保藏方法。

菌种的传代

将微生物接种至一新鲜培养基上/内，每萌发一次即为一代——USP

菌种的传代次数（自原始的菌种冻干粉起）不得超过5代——GMP/CP2005

菌种保藏

菌种保藏方法一般分四个阶段

（1）挑选特征典型的纯菌菌落

（2）能产生孢子或芽孢的微生物应用孢子或芽孢进行保存

（3）选择zui适宜的方法保藏

（4）定期对保藏菌种进行检查

常用的保藏方法

琼脂斜面低温保藏法

液体石蜡覆盖保藏法

半固体琼脂保藏法

甘油冷冻管保藏法

保藏芽孢液

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