MHCC-97L MHCC-97L细胞 细胞株培养

标题名称：MHCC-97L MHCC-97L细胞 细胞株培养

细胞名称：MHCC-97L 人低转移肝癌细胞

种属：人

组织来源：肝

生长状态：贴壁生长

细胞形态：上皮样

培养条件：培养基类型：DMEM（Hyclone SH30243.01)培养基

德国SERANAS-FBS-SA-015: 10%

抗生素：双抗

培养条件：37℃，CO2: 5%

传代方法   收到细胞后，在倒置显微镜下观察细胞生长状态：

如果没长满，将培养瓶用75%酒精消毒后在超净台内更换新鲜培养液，继续培养。

如果细胞已经长满（约80%-90%）则传代后继续培养。

贴壁细胞传代方法：

1 弃去培养基，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

2 加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），让胰酶与大部分细胞接触后放入37℃培养箱内，随时观察细胞状态变化，待细胞大部分变圆后加*培养基终止消化。

悬浮细胞传代方法：可以直接传代也可以离心法传代。

1 直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后，将上清吸掉1/2-2/3，吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

2离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内， 1000rpm，5分钟，去除上清，加新的培养液到离心管内，吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

 一般没有特殊说明，细胞一般是一传二。

冻存方法   70% *培养基，20%FBS，10%DMSO，现用现配。

储存：液氮中长期保存。

注  1 观察细胞在低倍镜下观察，便于整体估计细胞密度。

2 在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落，可离心吹打后重新种入瓶中培养。

3 收到细胞后若发现培养瓶破损、细胞污染等，请拍照并在一周内与我们。

我公司建议用我们实验室所用血清品牌和货号，细胞长势好，贴壁度强，凡购买我公司MHCC-97L细胞，我们会赠送20-50ML试用装一瓶。

MHCC-97L MHCC-97L细胞 细胞株培养-慧颖细胞库培养经验：1. 不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。如遇到有培养基越来越呈现紫色现象，是因为烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。（当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高）其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更*，超净台内根本就不点酒精灯。2. 不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长。3. 不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。在做血管平滑肌原代的时候，37度消化隔夜，细胞也没事。我们一般是等细胞*变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。

KYSE30细胞*人食管鳞癌细胞

RKO细胞*人结肠腺癌细胞

HO-8910细胞*人卵巢癌细胞

HS-578T细胞*人乳腺癌细胞

BE(2)-M17细胞*人神经母细胞瘤细胞

HT-22细胞*小鼠海马神经元细胞

MLE-12细胞*小鼠肺上皮细胞

HK-2细胞*人肾皮质近曲小管上皮细胞

MRC-5细胞*人胚肺成纤维细胞