CHO细胞培养说明

                      CHO细胞培养说明

产品名称：CHO细胞

中文名称：中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary)

种属：仓鼠

组织来源 卵巢

生长状态 贴壁生长

细胞形态 上皮样

CHO细胞具有不死性,可以传代百代以上

CHO细胞培养

1、培养条件：

培养基类型：DMEM（Hyclone SH30243.01)培养基

FBS（GIBCO 16000-044): 10%

抗生素：双抗

培养条件：37℃，CO2: 5%

2、传代方法：

收到细胞后，在倒置显微镜下观察细胞生长状态：

如果没长满，将培养瓶用75%酒精消毒后在超净台内更换新鲜培养液，继续培养。

如果细胞已经长满（约80%-90%）则传代后继续培养。

贴壁细胞传代方法：

1 ）弃去培养基，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

2 ）加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），让胰酶与大部分细胞接触后放入37℃培养箱内，随时观察细胞状态变化，待细胞大部分变圆后加*培养基终止消化。

悬浮细胞传代方法：可以直接传代也可以离心法传代。

1）直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后，将上清吸掉1/2-2/3，吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

2）离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内， 1000rpm，5分钟，去除上清，加新的培养液到离心管内，吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

 一般没有特殊说明，细胞一般是一传二。

3、冻存方法：

70% *培养基，20%FBS，10%DMSO，现用现配。

储存：液氮中长期保存。

4、注意事项

1 ）观察细胞在低倍镜下观察，便于整体估计细胞密度。

2 ）在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落，可离心吹打后重新种入瓶中培养。

3 ）收到细胞后若发现培养瓶破损、细胞污染等，请拍照并在一周内与我们。

来源：慧颖细胞库 整理编辑