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SK-OV-3人卵巢癌细胞 复苏传代

发布时间:2016-01-05浏览:2329次

细胞名称

SK-OV-3人卵巢癌细胞

种属

组织来源

卵巢

生长状态

贴壁生长

细胞形态

上皮样

培养条件

培养基类型:RPMI1640Hyclone SH30809.01B)培养基

FBS(SERANA S-FBS-SA-015): 10%

抗生素:双抗

培养条件:37℃,CO2: 5%

传代方法

收到细胞后,在倒置显微镜下观察细胞生长状态:

如果没长满,将培养瓶用75%酒精消毒后在超净台内更换新鲜培养液,继续培养。

如果细胞已经长满(约80%-90%)则传代后继续培养。

贴壁细胞传代方法:

1 弃去培养基,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

2 加1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),让胰酶与大部分细胞接触后放入37℃培养箱内,随时观察细胞状态变化,待细胞大部分变圆后加*培养基终止消化。

悬浮细胞传代方法:可以直接传代也可以离心法传代。

1 直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后,将上清吸掉1/2-2/3,吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

2离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内, 1000rpm,5分钟,去除上清,加新的培养液到离心管内,吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

 一般没有特殊说明,细胞一般是一传二。

冻存方法

70% *培养基,20%FBS,10%DMSO,现用现配。

储存:液氮中长期保存。

1 观察细胞在低倍镜下观察,便于整体估计细胞密度。

2 在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落,可离心吹打后重新种入瓶中培养。

3 收到细胞后若发现培养瓶破损、细胞污染等,请拍照并在三天内与我们。

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