小鼠ELISA试剂盒应用分析原理

小鼠ELISA试剂盒是基于标准的双抗夹心酶联免疫分析技术。将小鼠E选择素特体包被96孔小鼠E选择素检测抗体为生物素标记抗体试验样品和生物标记的检测抗相继加入到96孔中，然后洗涤平板。生物素-HRP加入96孔中，未与生物素标检测抗体结合的，被洗涤缓冲液洗掉HRP的底物TMB可与HRP（辣根过氧化物酶）发生酶促反应。TMB被HRP催化后变成蓝色物质，在加入酸性终止液后变为黄色。黄颜色的深浅与小鼠E选择素样品被捕获的量成正比。

酶联免疫测定方法是以抗原抗体间的特异反应为基础的，其与生化的化学反应有着本质的区别，并且因为标记物犹如位素、酶、荧光素、微量元素、发光物质等的掺人，酶联免疫测定技术从低敏捷的免疫沉淀和免疫凝集反应进入到了高敏捷的放射免疫、酶免疫、荧光免疫和发光免疫测定时代，可见酶联免疫测定更多的是用于生物活性物质的微量测定。

从理论上说，一种生物或生理活性物质，只要有办法得到其特异的抗体，就可以建立这种物质的酶联免疫测定方法。而在血站，HBsAg，抗HCV，抗HIV和梅毒抗体等标志物的检测，哪怕是1％的错误，对将要接受输血的特定患者来说，就是100％的灾害。可见，酶联免疫测定的质量控制有多么重要。近期，在电视、报纸等新闻媒体中，常可见到一些有关医患纠纷的报道，其中一些就与酶联免疫测定有关，如输血后丙肝病毒、艾滋病毒感染的发生，性病检测的假阳性等。在以前看来一些难以进行质量测定的微量生物活性物质，如受体、细胞因子以及酶等均可使用酶联免疫测定技术来测定。