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康宁基质胶354277、356234、354234、356231、354248操作注意事项
核心原理:>10℃开始凝胶,22℃以上快速成胶,全程控冷是关键
一、储存
1. 原装瓶-20℃存放,禁止放自动除霜冰箱、冰箱门位置,温度波动容易提前凝胶、降解
2. 融化后必须冰上无菌分装成单次用量,分装小管-20℃/-80℃保存,严禁反复冻融
3. 保质期:出厂起2年;稀释混好培养基/PBS后不可长期存放,现配现用
二、融化(最容易踩坑)
1. 正确方式:整瓶埋冰里,放4℃冰箱过夜缓慢融化;不要冷水浴、温水、室温化冻
2. 融化后在冰上轻轻颠倒混匀,不要剧烈吹打,减少气泡;全程冰上操作
3. 高浓度款、354277干细胞款黏度更高,融化更慢,更要严控温度
三、耗材与移液
1. 枪头、离心管、培养板、稀释用培养基/PBS全部提前预冷
2. 黏度大,优先用正向位移移液器/注射器,普通空气置换移液枪误差很大,高浓度基质胶尤其明显
3. 尽量避免产生气泡;气泡会造成铺胶不均、类器官长歪
四、稀释 & 铺板
1. 用冰无血清培养基或者冰PBS稀释,禁止用水稀释,会聚集沉淀
2. 稀释依据该批次COA上的蛋白浓度计算,不要固定体积稀释,不同批次浓度有差异
3. 薄胶(贴壁、侵袭):≥50 μL/cm²;厚胶(3D、类器官):150–200 μL/cm²
4. 铺完放37℃、5%CO₂孵箱静置30–60 min充分成胶,再加培养基和细胞;胶层不要吹干
五、分货号专属提醒
• ✅354234 / 356234(标准含酚红):常规肿瘤、侵袭、血管生成;酚红会干扰荧光检测,荧光实验不要选
• ✅356231(GFR无酚红):低生长因子、无酚红,适合荧光成像、分化实验,背景低
• ✅354277(hESC专用):适配mTeSR1,干细胞维持,对批次稳定性要求,尽量一次用完分装
六、禁忌清单
❌ 室温放置、手温接触基质胶
❌ 反复冻融、分装体积过大
❌ 除霜冰箱存放
❌ 用水稀释
❌ 融化后长期放4℃搁置
❌ 带气泡铺胶
七、常见异常
• 提前凝固:操作温度超标
• 胶层厚薄不均、斑点:气泡、耗材未预冷、稀释不均匀
• 细胞贴壁差:蛋白浓度算错、成胶时间不足、基质胶失活
慧颖生物常备以下货号康宁基质胶,常备现货,全程干冰发货,全国可发,当天可发,确保品质,确保售后
354277 康宁基质胶-酚红,适用于hESC,不含LDEV 5ML
356234 康宁基质胶-酚红,不含LDEV-标准型 5ML
354234 康宁基质胶-酚红,不含LDEV-标准型 10ML
356235 康宁基质胶-酚红,不含LDEV-标准型 5*10ML
356237 康宁基质胶-不含酚红,不含LDEV-标准型 10ML
356230 康宁基质胶-酚红,生长因子减量,不含LDEV 5ml
354230 康宁基质胶-酚红,生长因子减量,不含LDEV 10ML
354248 康宁基质胶-酚红,高浓度(HC),不含LDEV 10ML
354262 康宁基质胶-无酚红,高浓度(HC),不含LDEV 10ML
354263 康宁基质胶-酚红,高浓度(HC),生长因子减量,不含LDEV 10ML
356231 康宁基质胶-无酚红,生长因子减量,不含LDEV 10ML
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