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细胞名称:HeLa 人宫颈癌细胞
别名:HeLa细胞,人宫颈癌细胞系
种属:人
组织来源:宫颈腺癌
细胞形态:上皮细胞样
培养条件:
培养基类型:D-MEM 培养基
FBS: 10%
抗生素:双抗
培养条件:37℃,CO2: 5%
传代方法:
收到细胞后,在倒置显微镜下观察细胞生长状态:
如果没长满,将培养瓶用75%酒精消毒后在超净台内更换新鲜培养液,继续培养。
如果细胞已经长满(约80%-90%)则传代后继续培养。
贴壁细胞传代方法:
1 弃去培养基,用不含钙、镁离子的PBS 洗1-2 次。
2 加1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),让胰酶与大部分细胞接触后放入37℃培养箱内,随时观察细胞状态变化,待细胞大部分变圆后加*培养基终止消化。
悬浮细胞传代方法:可以直接传代也可以离心法传代。
1 直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后,将上清吸掉1/2-2/3,吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。
2 离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内,1000rpm,
5 分钟,去除上清,加新的培养液到离心管内,吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。
一般没有特殊说明,细胞一般是一传二。
冻存方法:
70% *培养基,20%FBS,10%DMSO,现用现配。
储存:液氮中长期保存。
注:
1 观察细胞在低倍镜下观察,便于整体估计细胞密度。
2 在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落,可
离心吹打后重新种入瓶中培养。
3 收到细胞后若发现培养瓶破损、细胞污染等,请在一周内与我们
。
来源:慧颖细胞实验室
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:王