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性价比高!LipofectamineTm 3000 (脂质体3000)转染试剂,货号:L3000015
Lipofectamine™3000 转染试剂 货号:L3000015 简介:
品牌:Thermo Fisher(Invitrogen)
规格:1.5 mL试剂盒(包含Lipofectamine™3000脂质体试剂 + P3000™增强试剂)
Lipofectamine 3000是基于新一代脂质纳米颗粒技术开发的阳离子脂质转染试剂,专为哺乳动物细胞质粒DNA转染优化,搭配配套P3000增强剂,显著提升核酸递送效率;同时兼顾低细胞毒性,是实验室主流通用型脂质体转染试剂。货号L3000015为小包装0.1mL规格,适合小规模条件摸索、课题组小量实验使用。

适合细胞种类:
✅ 常规易转染细胞系
HEK293、HeLa、Huh7、A549、MCF-7、NIH/3T3、HepG2、C4-2等肿瘤细胞、成纤维细胞
✅ 传统难转染细胞
原代上皮细胞、间充质干细胞、部分神经细胞、iPSC诱导多能干细胞
⚠️ 局限性:悬浮免疫细胞(T细胞、巨噬细胞)转染效果一般;原代神经元如需mRNA转染优先MessengerMAX。
产品介绍:
1. 套装组成:Lipofectamine 3000脂质体 + P3000™增强剂,二者搭配使用;仅转染siRNA时不需要添加P3000。
2. 储存条件:2–8℃避光冷藏,禁止冷冻,冻融直接失效。
3. 操作基础要求:推荐使用Opti-MEM减血清培养基稀释试剂;转染时培养基尽量不添加双抗。
4. 适用核酸类型:质粒DNA;可兼容siRNA、miRNA,不适合RNP复合物、长链mRNA(mRNA推荐MessengerMAX)。
产品优势:
1. 广谱高效,难转染细胞表现突出
相比Lipo2000,大量细胞系转染效率显著提升,很多传统难转细胞可获得稳定阳性率。
2. 细胞毒性更低
转染后细胞凋亡、漂浮更少,适合转染后长期功能实验、细胞活力敏感实验。
3. 实验重复性稳定
脂质颗粒均一,批次差异小,条件优化后结果稳定可控。
4. 支持共转染
可实现多质粒共转染,适配双荧光报告、CRISPR质粒系统。
5. 方案成熟
全球海量文献引用,公开优化方案多,新手更容易建立稳定转染体系。
产品应用:
1. 瞬时转染:质粒过表达、荧光标记质粒(GFP/RFP)、双荧光素酶报告基因实验
2. CRISPR/Cas9质粒介导基因敲除/敲入
3. 质粒+siRNA共转染,基因过表达+干扰联合实验
4. 肿瘤细胞、干细胞基因功能研究
5、蛋白体外表达初步筛选(小规模293表达)
常见问题:
购买&实验疑问解答
Q1:L3000015和大包装L3000150有什么区别?
A:配方一致;L3000015=0.1mL,适合条件摸索;L3000150=15mL大包装,适合高通量长期实验。
Q2:转染必须用Opti-MEM吗?
A:推荐Opti-MEM;紧急情况下无血清基础培养基可尝试,但转染效率大概率下降,不建议长期替代。
Q3:复合物孵育多久?
A:DNA复合物室温孵育10–15min,不要超过20min,避免脂质体团聚。
Q4:转染后什么时候换液?
A:细胞敏感株4–6h更换培养基;耐受强肿瘤细胞可维持过夜,根据细胞状态调整。
Q5:可以在含血清培养基制备复合物吗?
A:不可以!血清蛋白会破坏脂质-DNA复合物,必须无血清培养基稀释。
Q6:转染效率很低常见原因?
①质粒纯度不足、内毒素过高;②细胞汇合度不适宜(推荐70%-85%);③试剂冻存结冰失效;④DNA与试剂比例未优化。
Q7:能否用来转染siRNA?
A:可以,但不加P3000试剂;大规模RNA干扰实验优先选择Lipofectamine RNAiMAX。
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