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TeloHAEC细胞通过STR鉴定,提供支原体检测报告,人主动脉内皮细胞
种属:人
英文代号:TeloHAEC
组织来源:心脏;主动脉
疾病:端粒酶永生化细胞系
传代比例:1:2传代
wanquan培养基配置:基础培养基500ml;生长添加剂5ml;胎牛血清25ml;双抗5ml;0.3ug/mL嘌呤霉素
细胞背景:TeloHAEC是从一名正常23岁女性心脏中分离出的表现出内皮形态的hTERT不朽细胞。该产品在药物开发和心血管疾病研究中具有应用价值,TeloHAEC (ATCC CRL-4052) 细胞保留了重要的内皮细胞特征,如 CD31/PECAM-1 标记表达和 LDL 功能性摄取;在 TNFα 处理后,这些细胞显示出有效的炎症反应,并在 VEGF 刺激下增加增殖。当与成纤维细胞共培养时,TeloHAEC 细胞在体外也能形成对 VEGF 刺激和 suramin 抑制有反应的新生血管网络。
形态:内皮细胞样
生长特征:贴壁生长
STR:Amelogenin X CSF1PO 11,12 D5S818 12 D7S820 10,11 D13S317 9,12 D16S539 12,13 TH01 6,8 TPOX 8 vWA 15,16
倍增时间:每周 2至3次
换液频率:2-3天换液一次
培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件:冻存液:90%FBS,DMSO 10%,
或使用非程序冻存液:货号H-W-50/H-W-100
保藏机构:ATCC; CRL-4052
产品使用:仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
贴壁细胞接收注意事项: 贴壁细胞经过快递运输颠簸会出现漂浮脱落等情况: 收到先放培养箱静置稳定。如有脱落需收集处理,处理细节请查阅以下信息,原瓶内为运输培养液,血清含量只有5%,需及时更换专用培养基。
贴壁细胞传代步骤:
准备工作:胰酶和培养基(需要提前37度复温)、PBS(常温)避免细胞遇冷受刺激
(1) 吸出原培养液
(2) 加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃
(3) 加入1ml左右0.25%含EDTA的胰酶,轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞。
(4) 根据不同的细胞放入培养箱时及时关注消化时间,消化约2-3min,显微镜下看到细胞中间的细胞明显分离变圆细胞间隙变大,显微镜下看细胞呈单个游离状态,侧立培养瓶细胞可以滑落时可终止消化,可以轻拍培养瓶侧身。(消化时主要看消化状态,如果没有变圆,侧立时不能滑落时,可以适当延长消化时间,每30s观察一次细胞)
(5) 加入3ml含10%血清的培养基终止消化,轻轻吹打细胞使之脱壁并在液体里反复轻轻吹打(不要太用力)使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液。
(6) 收集细胞悬液离心,1000rpm/min(约250g) 5分钟,离心完吸出上清丢弃。
(7) 加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按需接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
(8) 检查培养箱二氧化碳,温度和水盘。
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