代次低，活力强！JM-1细胞，技术全程指导人B淋巴母细胞瘤细胞

代次低，活力强！JM-1细胞，技术全程指导人B淋巴母细胞瘤细胞

产品名称：JM-1细胞

中文名称：人B淋巴母细胞瘤细胞

组织来源：血

疾病：淋巴瘤;B 细胞

传代比例/细胞消化：1:2传代

培养基配置：IMDM 培养基；20%胎牛血清（推荐胎牛血清PRO HN -FBS -500)；0.05 mM β-mercaptoethanol；1%双抗

背景：是一种前B淋巴母细胞，是从B细胞淋巴瘤患者的血液中分离出来的。可用于免疫学研究。

形态：淋巴母细胞样

生长特征：悬浮生长

倍增时间：每周 2-3次

培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

冻存条件：冻存液：90%FBS，DMSO 10%,

或使用非程序冻存液：货号：H-W-50/100

保藏机构：ATCC; CRL-10423

备注：该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液，请勿直接倒掉细胞培养液。

悬浮细胞注意事项：

1. 悬浮细胞经过快递运输，会出现细胞皱缩和死细胞碎片等情况，收到时先放培养箱静置4小时以上，2.将瓶内全部培养基吸至离心管内离心收集，3.使用5-6ml新鲜培养基重悬细胞沉淀后接种T25培养瓶中继续培养。

悬浮细胞传代：
如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。                                        方法一：将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加新鲜培养液后重悬混匀按1：2的比例分到 新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力。                                                                                 方法二：1) 半换液处理，竖着培养瓶静置 1小时 左右，肉眼可见大部分细胞沉在底部；                                                                                                                              2) 轻轻吸掉 3ml 左右培养基，将剩余细胞悬起混匀；                                                   3) 将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 6-8 mL 培养基的培养皿中或者培养瓶中，一般这样传代 3 次左右可以离心传代一次。                                                                                            注意：使用试剂需要提前37度复温，避免细胞遇冷受刺激皱缩。

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所有的悬浮细胞培养方法注意要点：

第一：维持细胞正常增值速度范围，比如大多数悬浮细胞增值范围是30-50万个细胞/ml 的密度。

第二：提供优秀的培养环境，包含所使用的培养基 血清，温度，湿度等。

第三：有很多种悬浮细胞生长需要细胞之间有信号传递，因此需要相对聚集在一起则会生长的快，全部分散开了 可能就不长了，但是这个聚集在一起有一定的前提就是不能全部成团了 出现细胞团块内部 营养吸收和气体交换不通畅也会凋亡。