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论坛中讨论比较激烈的Elisa试剂盒几个问题

发布时间:2012-09-24浏览:2668次
mybiofield: 您好,我现在准备用ELISA法夹心法测人血清中ELISA试剂盒IL-1,IL-6,CRP,TNF,但是对具体操作上海ELISA试剂盒还有些很低级的问题,请问:    
1.预实验时,标准品的浓度怎样确定?梯度做几个,需要做空白孔吗?猪ELISA试剂盒复孔要做吗?
2.样本的梯度作白介素ELISA试剂盒几个?稀释倍数确定的依据时什么ELISA试剂盒价格?
3.我测的样本中TNF量很低,禽ELISA试剂盒国外有人用高敏试剂盒,国内有用化学发光法,您知道有没有更经济的方法?
生e网,多谢!
请问mybiofield:
双抗夹心法中,zui后TMB用硫酸终止,测量OD450的时候是用单波长450nm还是双波长测量?如果是后者,参考波长是哪个?630nm可以吗?
我阴性阳性血清都是从1:50开始被比稀释,到1:25600,阳性OD值都在1.0以上,1.7以下。阴性值在0.3以下。0.2的不多,多数在0.1及其以下。我的血清效价这么高,但是怎么OD值到不了别人说的2或者3呢?
mybiofield:
谢谢你的帮助
我是用间接ELISA检测人补体C1q 抗体,还想请教mybiofield
我的预实验是这样的
1、用pH9.6,0.05M的碳酸盐稀释抗原C1q,10ug/mL,5ug/mL,2.5ug/mL
100uL/孔,4度过夜,PBST洗板三次
2、用10%的小牛血清(pH7.2的PBS),200uL/孔,37度3h,PBST洗板三次
3、加入阴阳性血清100uL/孔,37度,2h,PBST洗板五次
4、 PBST(含1%的小牛血清)稀释酶标记的羊抗人IgG1:10000,1:20000, 1:40000,100uL/孔 ,37度,半小时
结果:   10ug/mL  5ug/mL  2.5ug/mL
1:10000 +   0.983  0.740  0.714
1:10000 -   0.577  0.676  0.576
1:10000空白 0.180  0.134  0.097
1:20000 +   0.508  0.506  0.367
1:20000 -   0.333  0.385  0.313
1:20000空白 0.085  0.094  0.078
1:40000 +   0.331  0.379  0.229
1:40000 -   0.233  0.303  0.261
1:40000空白0.061  0.068  0.06
请mybiofield帮忙分析,谢谢。用Elisa试剂盒的时候我该怎么选择包被浓度,酶的浓度以及封闭的条件如何,多谢
mybiofield :你好
我们现在的实验是从肝组织匀浆中检测TNF-a,但好几次预试的结果,TNF-a的含量都超过了Elisa试剂盒的上限,我们的Elisa试剂盒是从晶美买的,肝匀浆的浓度从 1:10 1:20 1:40 到1:100 1:200都没有很大的区别,匀浆用的是PBS,匀浆方法用的是先用匀浆器研碎,再在-86度冰箱反复冻融3次,其余均严格按Elisa试剂盒内说明操作,请问这可能是哪一步出了问题?或是肝匀浆本身上海ELISA试剂盒也会导致假阳性结果?如何才能解决?ELISA试剂盒价格谢谢了,在线等!
mybiofield :你好
能不能说一点点关于Elisa试剂盒保护液的配方猪ELISA试剂盒
gsljz wrote:
请问楼主:禽ELISA试剂盒我想自己做某个抗原成份的elisa试剂,ELISA试剂盒即自己包被酶标板,没有抗原做标准品怎么办?白介素ELISA试剂盒是否需要去买?     
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