ELISA试剂盒用于胃蛋白酶原I检测

【实验原理】     该ELISA的设计，研发和生产的目的是对人血浆样品中的胃蛋白酶原I浓度进行定量检测。ELISA试剂盒它是用两个单抗与猪ELISA试剂盒人胃蛋白酶原I的不同抗原表位相结合，而不和胃蛋白酶原II发生交叉反应的“双抗体夹心”上海ELISA试剂盒
技术。

将含有胃蛋白酶原I的标准品、ELISA试剂盒价格质控品、和待测样品加入链霉亲和素包被的微孔板中。随后，将生物素偶联的抗体和辣根过氧化酶（HRP）标记的胃蛋白酶原I特异抗体混合物禽ELISA试剂盒添加到各个孔中。白介素ELISA试剂盒经过*个保温孵育期，形成了“链霉亲和素-生物素抗体—胃蛋白酶原I—HRP抗体”的“双抗体夹心”结构，生物素偶联抗体和“双抗体夹心”结构被微孔板的内壁吸附住。各孔中的游离蛋白质和游离HRP标记抗体在洗涤过程中被冲走。将微孔板在基质溶液中孵育一段时间，然后在酶标仪下测量。微孔板内壁的示踪抗体与胃蛋白酶原I的连接酶活性与样本中的胃蛋白酶原I的浓度成正比。根据标准品中不同的胃蛋白酶原I的浓度，按照“点到点”，“立体曲线”或者“4-参数法”绘制标准曲线。待测样品中的人胃蛋白酶原I的浓度可以直接从标准曲线上读取。

 简要实验步骤：
1、添加25?L的标准品、质控品和病人样本到的孔中；
2、在各孔中添加100?L抗体混合物；
3、将溶液混合，然后用封口膜盖住，室温下孵育1小时；
4、将各孔清洗5次；
5、在各孔中添加100 ?L的ELISA HRP 基质；
6、用封口膜封住微孔板，室温下孵育20分钟；
7、在各孔中添加100?L终止液；
8、读取450nm处的吸光度。

【预期用途】
该ELISA（酶联免疫吸附测定）试剂盒是用来定量检测血清中人胃蛋白酶原I的浓度。血清中人胃蛋白酶原I的检测，对诊断胃粘膜分泌酸的功能状况有重要作用。

【生理学简介】
胃蛋白酶原含有一条多肽链，该肽链有375个氨基酸，其平均分子量为42kDa。胃蛋白酶原I在胃部中的胃粘膜主细胞和颈粘液细胞中合成，胃蛋白酶原II不仅能在胃粘膜主细胞和颈粘液细胞中合成，还能在近端十二指肠腔和十二指肠腺等的干净粘液细胞中合成。临床上，可以通过检测胃蛋白酶原I和胃蛋白酶原II的浓度，诊断严重萎缩性胃炎。萎缩性胃炎和肠化生是胃癌的癌前期病变，因此确诊萎缩性胃炎是诊断早早期胃癌或可治愈的胃癌的有效手段。血清中胃蛋白酶原的测定可作为“血清活组织检测”，诊断是否患有萎缩性胃炎和浅表性胃炎。

萎缩性胃炎：若血清中胃蛋白酶原I水平低于25ng／ml则可确定为萎缩性胃炎。同时可以观察到随着萎缩性胃炎患者的粘膜损伤程度加剧，血清胃蛋白酶原Ｉ水平下降。早期萎缩性胃炎的血清胃蛋白酶原Ｉ水平的诊断灵敏性和特异性分别为92％和90％。另一方面，恶性贫血患者和萎缩性胃炎患者的血清胃蛋白酶原Ｉ浓度下降，而胃蛋白酶原II浓度不变或者升高。因此，萎缩性胃炎患者的胃蛋白酶原I/II的比例显著低于浅表性胃炎患者或正常胃粘膜者。

胃癌：ELISA试剂盒胃癌患者中的血清胃蛋白酶原Ｉ水平和胃蛋白酶原I／II比例都很低，胃蛋白酶原Ｉ水平低和胃蛋白酶原I／II比值小的群体，患胃癌可能性为其他人的三倍。此外，血清胃蛋白酶原Ｉ水平低的群体可能比其他人更易患肠化生型胃癌。

十二指肠溃疡：低血清胃蛋白酶原Ｉ浓度可以排除十二指溃疡的诊断。尽管在临床上，单一高胃蛋白酶原Ｉ猪ELISA试剂盒浓度对确定十二指肠溃疡ELISA试剂盒价格的诊断作用很小，上海ELISA试剂盒然而，若高胃泌素血症患者的血清胃蛋白酶原Ｉ禽ELISA试剂盒浓度偏高,则患有胰原性溃疡病综合征白介素ELISA试剂盒（Zollinger-Ellison综合征）的几率很大。