ELISA法检测HBV与金标快速法两者相比较

　　探讨hbv采用金标快速法与elisa法检测的结果对比分析。方法 本次研究选择我院体检某校新生为对象,分别采用酶联免疫吸附试验（elisa）和金标快速法对hbv进行检测,就临床结果进行回顾性分析。结果 elisa法与金标快速法平行检测hbv结果,经rpha法初筛,200份为hbsag阳性血清,对其分别使用elisa法与金标快速测试法对乙肝五项进行平行检测,结果无明显差异（p>0.05）。

    hbv五项指标2种方法检测结果的总符合率分别为98.5%、99.5%、99%、96%、96.5%。以elisa为常规方法对金标快速测试法进行验证,则金标法分别为99.5%、100%、98.5%、94.5%、95%敏感性。特异性分别为84.5%、99.5%、96.5%、96%、96%。结论 金标快速法更方便、简单、准确、快速,在对乙肝病毒五项指标快速测定中较为适用,无需温育、洗涤、终止等相对复杂的步骤,对仪器设备要求不高,可通过肉眼在15min后读出结果,可将此方法用于健康查体、大规模流行病学调查中,特别是在各种内窥镜检查的术前,和健康人群的筛查,值得广泛推广应用。病毒性肝炎在临床具有较强感染力、发病率较高,对人类健康造成严重威胁的传染性疾病,其中危害zui大的是乙型肝炎（hbv）,hbv表面携带者至2002年止,据who初步估计有4亿以上,其中约有1.3亿发生在我国,且母婴传播所造成的感染约占30%～50%[1]。

    在对乙肝预后进行预测、流行病学调查、献血人员筛查、公共环境卫生、乙型肝炎免疫水平等实验室检测中,乙型肝炎表面抗原（hbaag）、e抗原（hbeag）、抗心抗体（抗-hbc）、表面抗体（抗-hbs）、e抗体（抗-hbe）等实用项目检测的方法较为重要。本次研究选择我院体检某校新生为对象,分别采用酶联免疫吸附试验（elisa）和金标快速法对hbv进行检测,就临床结果进行回顾性分析。

    1 资料与方法
    1.1 一般资料 本次研究对象4600例,行3～5ml静脉血采集,将血清分离,初筛应用反向被动血球凝集试验（rpha）的方法,将hbsag阳性的血清对乙肝hbaag、抗-hbs、抗-hbc、hbeag、抗-hbe分别用elisa和金标法平行进行检测,随机分为elisa法组200例,金标快速法组200例,2组对象在年龄、性别、病性、病程及hbeag检测方面比较无统计学差异（p >0.05）,具有可比性。
    1.2 方法
    1.2.1 金标快速检测法 血清（血浆）与乙肝抗体（抗原）内的相应抗原（抗体）特异性结合以金、银、硒等为标志物,依据双抗原（抗体）夹心原理,对该抗体（抗原）在经组织化学的呈色反应之后进行定性检测。先从冰箱中在试验前取出测试条,常温1～2h放置后使用,依次在试验前将hbv五项指标测试条的一端在盛有血清标本的试管中插入约5s,后取出在白纸上放置,对弱阳性结果等待10～15min行判断,对强阳性结果在2min内即可观察,zui迟不宜超过20min。结果判定:若有一条红色线先后在测试条中段出现,则为阳性,若无红色线出现为测试条失效或试验失败。

    1.2.2 elisa法 hbsag目前常用的免疫测定方法为elisa试验,应用多克隆或单克隆抗体,针对hbaag的α决定簇,为双抗体夹心模式,可行0.5ng/ml以下的测定。乙型肝炎在早期诊断指标为血清中检出hbsag,除急性期外,在发生hbv感染后,大部分人无临床表现。但hbsag可在血中检出,这类人群为hbsag携带者。 hbv感染的标志为血清hbaag。

    1.3 统计学方法 采用spss13.0统计学软件,计数资料行c2检验,p 0.05）,见表1。hbv五项指标2种方法检测结果的总符合率分别为98.5%、99.5%、99%、96%、96.5%。以elisa为常规方法对金标快速测试法进行验证,则金标法分别为99.5%、100%、98.5%、94.5%、95%敏感性。特异性分别为84.5%、99.5%、96.5%、96%、96%。

    2 讨论
    慢性乙型肝炎在我国为高度流行区,在我国人口中,hbsag阳性者占8.83%,远远超出世界水平,hbv变异株近年来有研究出现使患者hbv感染复制状况更难诊断,常有漏诊发生[2]。荧光定量pcr为一项实时检测技术,操作通过*闭管式进行,使扩增产物的污染大大减少,并使检测的特异性提高,扩增产物或通过电脑自动读数来行定量,使检测的灵敏度提高,避免了普通pcr检测方法的缺点[3]。

    因fprobe的加入,fq-pcr更加提高了产物荧光定量检测的特异性,并可得出定量结果,减少了实验步骤,并使操作进一步简化,使自动化的程度增加。 胶体金标记抗体检测细菌表面抗原是1997年有学者曾报道的方法,在多种病原微生物中成为重要的检测手须,本次研究采用金标快速法对hbv五项进行检查,并和elisa行平行试验,总符合较高,且2种方法检测结果无明显差异性,与elisa法比较,金标快速法更方便、简单、准确、快速,在对乙肝病毒五项指标快速测定中较为适用,无需温育、洗涤、终止等相对复杂的步骤,对仪器设备要求不高,可通过肉眼在15min后读出结果,可将此方法用于健康查体、大规模流行病学调查中,特别是在各种内窥镜检查的术前和健康人群的筛查,故在hbv五项指标快速测定中,金标快速法为较理想的方法,快速、使用简单、准确性高,值得广泛推广应用。