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抗生素在细胞培养中应该怎么用?

发布时间:2020-04-28浏览:1812次
   细胞培养是指在体外模拟体内环境(无萄、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的-种方法。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是-个*的过程,其本身就是细胞的大规模克隆。该技术可以由一一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术*的环节。

  细胞培养起来感觉会很简单,但是有时候也会出现各种不顺的问题 ,例如:污染,生长缓慢,变形,死亡率过高…..,毕竟细胞是体外培养的,在培养的时候会受到各种外界因素的影响,培养基、血清、孵育温度、C02浓度等,除此之外还有抗生素……

  一般来说细胞培养是不需要加抗生素,因为培养过程必须要无菌操作。如果实验室污染严重,建议*打扫一下,擦拭消毒、熏蒸或者紫外照射杀菌。然后把细胞实验涉及到的试剂都做下空培,包括使用的胰酶,胎牛血清等。如果实验室无菌条件优异,细胞培养可以不加抗生素,因为抗生素的药效水平和毒性水平非常接近。特别是用于细胞治疗的培养。

  若当心细胞感染,可以适当添加一些抗生素预防,如果已经有污染,建议按照以下方案添加:

  1、常用的是青霉素、链霉素联合抑制细菌,即所谓的“双抗”,主要针对革兰氏阳性菌、阴性菌;对于细菌的感染也可用庆大或卡那霉素;

  2、如果真菌污染严重,可用两性霉素/制霉菌素控制;

  3、若为支原体污染, 可以用sciencell的支原体抑制剂。在培养基中加入新鲜的支原体抑制剂溶液,每3-4天更换一次。一两周内的足以消除污染。可以有效的可以查杀各种原因感染的支原体。

  抗生素多加对细胞无益。加抗生素的主要问题是操作不慎造成的污染未必能及时发现,造成后期较大的损失。

  青链霉素是广谱抑菌剂,对革兰氏阴性和阳性细菌有抗菌性,青霉素影响细菌细胞壁合成的终末步骤,在转肽反应步骤一直多肽链的延伸;链霉素与核糖体的30S亚基单位结合,阻断细菌蛋白质的组成。比较常用 。

  一旦细胞污染,处理办法扔掉,查找原因,全面预防。如果细胞是经过大量工作或高价才得到的,扔掉实在可惜,可以针对污染源加抗生素。也可以不加抗生素进行单克隆有限稀释至96孔板,再克隆化。

  但是污染带来的实验影响和损失不可估量,主要的是平常都要做好细胞房的管理和消毒工作。防止污染的发生。

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