人肠脂肪酸结合蛋白（iFABP）ELISA试剂盒

慧颖生物ELISA试剂盒厂家，提供人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒以及说明书，操作步骤和原理。

产品名称：人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒

英文名称：Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit

品牌：DECO

规格：48T/96T

货号：DECO0004

储存温度：-20℃(较长时间不用时)；2-8℃(频繁使用时)

有效期：6个月

产品特点：检测范围广，灵敏度高，特异性强，精密度高，比较有针对性

品牌优势：提供免费代测，专业技术工程师帮老师做均值分析，变异系数分析等

ELISA各种样本收集、处理、保存方法

1. 血清标本收集、处理、保存方法：

用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本，全血标本室温放置1－2 h或4℃guo夜，然后4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

2. 血浆标本收集、处理、保存方法：

根据样本要求选择EDTA或肝素钠或枸缘酸钠作为抗凝剂，用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本，室温混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清即为血浆。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

3. 尿液标本收集、处理、保存方法：

用干净容器收集尿液，4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

4. 唾液标本收集、处理、保存方法：

用干净离心管收集唾液，4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

5. 细胞标本收集、处理、保存方法:

（1）细胞培养上清

 取细胞培养上清到干净离心管中，4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

（2）细胞裂解液

收集细胞培养液，4℃、3000 rpm/min离心20 min，弃去上清，用预冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗涤三次。加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑制剂）重悬细胞。通过反复冻融，使细胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min离心20 min，除去细胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

6. 植物标本收集、处理、保存方法：

取适量大小组织块（一般0.2－0.5 g），用预冷的PBS缓冲液（0.01M，PH 7.4）漂洗三次，滤纸拭干水分。准确称重，放入匀浆管中，加入4倍体积的匀浆介质（0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.4 PBS缓冲液）于匀浆管中，冰水浴条件下，剪碎组织块，手工匀浆或机器匀浆，制成匀浆液。4℃、10000 rpm/min离心20 min，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

7. 粪便标本收集、处理、保存方法：

采集时用干净的竹签挑取粪便样本到离心管中，向离心管中加入适量PBS缓冲液（0.01M，PH 7.4），搅拌均匀。然后4℃、10000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

8. 组织标本收集、处理、保存方法：

将组织样本用PBS缓冲液（0.01M，PH 7.4）冲洗，洗去组织表面残留的血液或杂质。将组织块称重，记录后剪碎（碎块尽量小）。将组织按一定的比例（通常组织重量：PBS体积=1：9）加入预冷的PBS缓冲液（临用前加入蛋白酶抑制剂）中匀浆，匀浆时置于冰上。吸取匀浆液到离心管中，4℃、10000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

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ELISA试剂盒标本及收集、贮运要素

① 严峻溶血：以HRP为符号的ELISA测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色构成假阳性；

② 混有红细胞的血清易沉积或附着在聚乙烯孔内不易洗净

③ 如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会发生假阳性反响；

④ 标本凝结不全，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开端凝结时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以构成肉眼可见的纤维蛋白块，易构成假阳性成果；

⑤ 采血试管洗涤不*、重复运用易穿插污染

⑥ 塑料试管能吸附抗原物质 ，样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降构成假阴性。

血清标本宜在新鲜时检测，严峻溶血标本禁用。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合，使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻住血清融解后，蛋白质部分浓缩，散布不均，应充沛混匀并避免发生气泡。混浊或有沉积的血清标本应先离心或过滤，弄清后再检测。重复冻融会使 抗体 效价跌落，所以测 抗体 的血清标本如需保存作屡次检测，宜少量分装冰存。

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ELISA试剂盒使用问题及解决方法：

【1】：加样量不一致？

解决方法：样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。

【2】：样品数量多少不一，加样时间有长有短？

解决方法：重复某一样品时，加样时间尽可能与di yi次接近。

【3】：保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致？

解决方法：重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性。

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