NCI-H647细胞/ 人非小细胞肺癌细胞 培养步骤

NCI-H647细胞/ NCI-H647人非小细胞肺癌细胞     培养步骤

产品名称：NCI-H647细胞

中文名称：人非小细胞肺癌细胞；NCI-H647

规格：T25

形态特征：

生长状态：　

特征特性：贴壁生长

培养条件：RPMI-1640+10%FBS（推荐HAKATA优等胎牛血清货号：HN-FBS-500）

传代方法：1：3-1:6传代；每周换液2次。

冻存条件：HAKATA ® 无血清细胞冻存液 货号：H-W-100 规格：100ML

支原体检测：阴性

使用权限：A类

参考文献：

供应商：上海慧颖生物科技有限公司

复苏周期：10个工作日左右

培养步骤：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL*培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的*培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，*脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右*培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

2、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右*培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

慧颖生物是一家专业从事细胞培养相关产品的公司，拥有独立细胞房（可随时约定参观），供应胎牛血清，无血清细胞冻存液，无血清培养基，常规培养基，胰酶，双抗，*培养基，STR鉴定细胞，感受态细胞等，专业，专注，性价比高，是您Shou选之家。

热卖细胞：

货号    简称    中文名称    培养条件    特性    形态

H001    HeLa    人宫颈癌细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H002    143B    人骨肉瘤细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H003    293T    人胚肾细胞 DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H004    A2780   人卵巢癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H005    A549    人非小细胞肺癌细胞  RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H006    A673    人尤因肉瘤细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    多边形

H007    AGS 人胃腺癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H008    BGC823  人胃腺癌细胞(低分化)    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H009    C33A    人宫颈癌细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H010    CACO2   人结直肠腺癌细胞    DMEM+20% FBS    贴壁    上皮细胞样

H011    COLO205 人结肠癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   半悬浮  上皮细胞样

H012    DU145   人前列腺癌细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H013    ES-2    人卵巢透明细胞癌细胞    McCoy's 5A+10%FBS   贴壁    上皮细胞样

H014    H1650   人非小细胞肺癌细胞  RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H015    H460    人大细胞肺癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H016    HACAT   人永生化角质形成细胞    DMEM+15% FBS    贴壁    上皮细胞样

H017    HCT116  人结肠癌细胞    McCoy's 5A+10%FBS   贴壁    上皮细胞样

H018    HEK293  人胚肾细胞 DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H019    HEPG2   人肝癌细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H020    HGC27   人胃癌细胞(未分化)  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H021    HT-29  人结肠癌细胞    McCoy's 5A+10%FBS   贴壁    上皮细胞样

H022    HUVEC   人脐静脉内皮细胞    ECM 贴壁    上皮细胞样

H023    KYSE150 人食道癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H024    L02(HL7702)(QSG-7701)   人正常肝细胞    RPMI-1640+20% FBS   贴壁    上皮细胞样

H025    LOVO    人结肠癌细胞    F12K+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H026    MCF-10A 人正常乳腺上皮细胞  DMEM/F12(1:1) 培养基+胰岛素(10ug/ml)+表皮生长因子(20ng/ml)+100ng/ml霍乱病毒 +5% 马血清   贴壁    上皮细胞样

H027    MCF7   人乳腺癌细胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰岛素    贴壁    上皮细胞样

H028    LX-2    人肝星状细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H029    MDA-MB-468  人乳腺癌细胞    L-15+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H030    MIA Paca2   人胰腺癌细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样 少量圆形悬浮

H031    NCI-H1299   人非小细胞肺癌细胞 RPMI1640+10%FBS 贴壁    上皮细胞样

H032    PANC-1  人胰腺癌细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H033    RBE 人肝胆管癌细胞 DMEM+10%FBS 贴壁    上皮细胞样

H034    SAOS-2  人成骨肉瘤细胞 McCoy's 5A+15%FBS   贴壁    上皮细胞样

H035    SiHa    人子宫颈鳞癌细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H036    NB 4    急性早幼粒细胞白血病细胞    RPMI-1640+10% FBS   悬浮    圆形

H037    SPC-A-1 人肺腺癌细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H038    SW480   人结肠癌细胞    L-15+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H039    U-87MG 人脑星形胶质母细胞瘤细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H040    ZR-75-1 人乳腺癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H041    SW1116  人结肠腺癌细胞  L-15+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H042    293A    人胚肾细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H043    SGC-7901    人胃腺癌细胞    RPMI-1640 +10% FBS  贴壁    上皮细胞样

H044    Ishikawa    人子宫内膜癌细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H045    Eca-109 人食管癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H046    RD-ES   人尤文氏肉瘤    RPMI-1640+15% FBS   贴壁    上皮细胞样

H047    NCI-H1437   人肺癌细胞  RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H048    HOS     人骨肉瘤细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H049    Hela S3 人宫颈癌细胞    F12K+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H050    ECC1    人宫颈内膜腺癌细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H051    SUP-B15     人Ph+急淋白血病细胞系   IMDM+20% FBS    悬浮    淋巴母细胞样

H052    TF-1    人血液白血病细胞    RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重组人GM-CSF   悬浮    淋巴母细胞样

H053    NCI-H446    人小细胞肺癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H054    GES-1   人胃正常黏膜上皮细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H055    IOSE80 人卵巢正常上皮细胞株    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H056    GIST882 人胃肠道间质瘤细胞  RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H057    KGN 人卵巢颗粒细胞癌    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H058    U937    人组织细胞淋巴瘤细胞    RPMI-1640 +10% FBS  悬浮    单核细胞样

H059    SV-HUC-1    人膀胱上皮永生化细胞    F12K+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H060    tpc-1   人乳头瘤状甲状腺癌细胞  F12K+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H061    hela-luci   Luciferase稳定表达Hela细胞 DMEM(L)+10% FBS 贴壁    上皮细胞样

H062    colo320 人结肠癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   半悬浮  圆形

H063    bxpc-3  人胰腺腺癌细胞  RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H064    raji    人Burkitt's淋巴瘤细胞  RPMI-1640+10% FBS   悬浮    淋巴母细胞样

H065    5637    人膀胱癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H066    chang-liver 人肝细胞(已被hela污染）    DMEM(L)+10% FBS 贴壁    上皮细胞样

H067    a549-gfp    gfp标记的A549细胞  F12K+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H068    hs578.t 人乳腺癌细胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰岛素    贴壁    上皮细胞样

H069    T24 人膀胱移行细胞癌细胞    McCoy's 5A+15%FBS   贴壁    上皮细胞样

H070    K562    人慢性髓系白血病细胞    IMDM+10% FBS    悬浮    淋巴母细胞样

H071    EH-GB1  人胆囊癌细胞（表达GFP和RED2）  DMEM+15% FBS    贴壁    上皮细胞样

H072    skov-3  人卵巢腺癌细胞  McCoy's 5A+15%FBS   贴壁    上皮细胞样

H073    ECV304  人膀胱癌细胞（T24衍生物）   M199+20%FBS 贴壁    上皮细胞样

H074    nci-n87 人胃癌细胞  RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H075    B-CPAP  人甲状腺癌细胞  RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H076    NCI-H1975   人非小细胞肺腺癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H077    HK-2    人肾皮质近曲小管上皮细胞    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H078    J82 人膀胱癌细胞    DMEM(L)+10% FBS 贴壁    上皮细胞样

H079    A431    人皮肤鳞癌细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H080    MG63    人骨肉瘤细胞    DMEM(L)+10% FBS 贴壁    上皮细胞样

H081    SW48    人结肠癌细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H082    ME180   人宫颈表皮样癌  McCoy's 5A+10%FBS   贴壁    上皮细胞样

H083    hepaRG-GFP  Gfp标记的人肝癌细胞 DMEM(L)+10% FBS 贴壁    上皮细胞样

H084    BEAS-2B 人正常肺上皮细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H085    THP-1  ATCC：TIB-202    人髓系白血病单核细胞    RPMI-1640+10% FBS   悬浮    单核细胞样

H086    PC9 人肺癌细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H087    Fadu    人咽鳞癌细胞    DMEM(L)+10% FBS 贴壁    上皮细胞样

H088    Huh7    人肝癌细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H089    Hcc9810 人肝癌细胞  RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H090    Jurkat cloneE6-1    人急性T淋巴细胞白血病细胞  RPMI-1640+10% FBS   悬浮    淋巴母细胞样

H091    KBM-7   人慢性粒细胞白血病细胞  IMDM+10% FBS    悬浮    圆形

H092    GBC-SD  人胆囊癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H093    JEKO-1  人套细胞淋巴癌细胞  RPMI-1640+20% FBS   悬浮    圆形

H094    CAL27   人口腔鳞癌  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

H095    DB  弥漫大B细胞淋巴瘤细胞  RPMI-1640+10% FBS   悬浮    淋巴母细胞样

H096    hne1-lmp1   转入LMP1基因人鼻咽癌细胞   RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H097    nci-h226    人肺鳞癌细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

H098    hepg2.2.15  人肝癌细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样