GIBCO原装胎牛血清10270-106行货*|功能

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胎牛血清功能：

1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5.起酸碱度缓冲液作用。

6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

7.内毒素极低，其次无菌过滤，后三次为0.1um无菌过滤处理。

8.进行细菌、真菌、支原体、病毒及病毒抗体检测，符合动物协会要求

9.建议使用范围：科研使用，细胞培养

10.储存：-20℃冻存，避免反复冻融，4°C保存不超过1个月。反复冻融会破坏血清中有效成 分，影响血清品质。

胎牛血清、小牛血清、新生牛血清之间的区别：

1、采血时间不同：

胎牛血清（Fetal Bovine Serum）是在母牛怀孕5-8个月时，通过胎牛心脏穿刺采血获取的血清。新生牛血清（Newborn Calf Serum）是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。小牛血清（Calf Serum）采自出生后2周至1年内的小牛静脉取血。

2、组份与比例不同：

两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎发育所必需的生长因子。一些生长因子到胎牛10个月时就消失了。

 3、用途与用法不同：

某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可。使用浓度一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。血清保存和使用须注意：血清应保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时，推荐我们总结出来的三步法（见下表），可预防沉淀发生。不推荐血清4℃过夜融化，更不能直接将冷冻的血清放入37℃水浴或者温箱中。因为血清在融化时，蛋白先融，冰块后融，局部蛋白浓度过高，易发生沉淀。血清在解冻后，应按用量分装并于-20℃保存，避免反复冻融。

关于细胞培养中的“黑胶虫”：

在细胞培养中常可见到培养液中出现大小不等、形态不同的黑色颗粒。只要这种黑色颗粒一出现，我们的细胞不是停止生长就是陆续死亡。人们常称这种颗粒为「黑胶虫」。听说，这种黑色颗粒还会「游动」？小编想想都鸡皮疙瘩掉一地。难道真的是细胞长虫子了吗？

关于「黑胶虫」的传说：

① 分类

关于「黑胶虫」的分类，学术界没有明确给予说法。

1. 部分认为黑胶虫污染是微生物感染，但是没把它归为某种特定的生物类型，目前「黑胶虫」尚属一种未知生物。根据中国病毒所和军科院的鉴定，这可能是一种寄生于牛血清内的原虫，似乎和草履虫和变形虫有类似之处，但是由于课题经费不够而不能继续下去，终也没有有力证明黑胶虫是否为原虫；

2. 同时，另一部分学者不认为所谓的「黑胶虫」是一种生物污染，而认为是细胞碎片，是在细胞培养时由于细胞凋亡或死亡产生的；

3. 此外，还有学者认为「黑胶虫」是玻璃瓶中类似氧化硅的物质。

② 形态

直径约 0.5-1 μm，显微镜观察为黑色，线状、杆状或椭圆形，不同人员观察到的形态不一致。

③ 运动

显微镜下有典型的布朗运动（不规则的原地小距离抖动），即很多细胞培养者看到的，像黑色的小虫游来游去。但是在物理学上来说，只要颗粒足够小，即可在液体中呈布朗运动，因此，呈「布朗运动」并不足以说明「黑胶虫」为生物体。

④ 抗性

耐高温高压，抗细菌和抗霉菌的药物对「黑胶虫」无效，可以保守的判定「黑胶虫」不属于细菌、霉菌。

⑤ 环境

可存在于细胞培养基中，可随细胞传代存在。

关于「黑胶虫」的猜测

① 细胞碎片

随着细胞培养的继续，部分细胞开始衰亡，细胞膜结构破裂，破裂之后的细胞内容物泄露到培养液中。尤其是溶酶体的破坏，连续性地造成其他细胞和细胞器的损伤，如果换液不很勤，又会出现进一步破坏和残渣的出现。 假设，这种黑点是某种生物，其大小及运动状况达到了用显微镜可以观察出的程度，那么其营养代谢和能量需求也就可想而知，培养液中的养分消耗、酸碱含量程度等都应发生明显变化。然而，并没有报道指出这些状况出现在在所谓的「黑胶虫」感染过程中，也没有有力证据指出这种黑点的出现会对细胞状态产生直接影响。当细胞状态下降时，一些学者观察到黑点明显增多，这很有可能是细胞状态下降时，细胞衰亡产生的细胞碎片。

② 氧化硅类似物

有报道称，这种黑点其实不是一种生物，是无机物，其本质是玻璃培养瓶里的硅颗粒，会在一定程度上影响细胞生长。细胞状态好时，不明显；细胞状态较差、数量较少时才容易看到，因此建议使用一次性培养瓶。

③ 支原体

有人曾认为这种黑点可能是支原体污染，理由是它通过滤膜，但已有充分的证据显示它并不是支原体：

1. 这种黑点光镜下可见，支原体在光镜下不可见。

2. 这种黑点在多种染色后可见，HOECHST 即能将它染色，而支原体用普通染色法不易着色，姬姆萨染色浅，革兰染色为阴性。因此，「黑胶虫」是支原体的可能性很小。

④ 寄生虫原虫

有人认为这种黑点属于寄生类的原虫，在 400 倍以上的高倍镜下可以清楚的看到这种黑点有两种不同形态，一种较大，运动较慢；另一种较小，运动较快；个体小分布在大的周围。同时，这种黑点的存在不依赖于活细胞。有人做过这样的试验，单纯培养有黑点污染的血清，直到满视野遍布大小不一的黑点。据说，病毒所和军科院曾开展过相关研究，然而由于课题经费不足没有继续进行，目前，并没有明确的证据显示这种黑点为原虫。

解析

从前面关于这种神秘的黑点的描述可以看出，人们遇到的黑点其实并不一样，有像细胞碎片的、有像氧化硅的、有像支原体的、有像原虫的等等。目前，国内各实验室环境、器材条件参差不齐，实验人员的操作质量也不尽相同，很多人发现细胞被细菌污染了，不好处理，而却描述出来的现象和流传的「黑胶虫」类似，一传十，十传百，「黑胶虫」被传说的变得越来越神秘，对「黑胶虫」的描述也五花八门，众口不一。很多实验人员细胞培养失败，就会把失败的原因归结为有的黒胶虫污染。其实，黑胶虫是否存在，还有待于科学的发展。但有一点可以肯定的，大部分人发现的「黒胶虫」并不是真正那个未知的黒胶虫，而是常见的细菌、真菌、原虫等微生物污染。

报道

在《细胞生物学杂志》中《对细胞培养中一种黑色运动颗粒性质的研究》论文，文中经过多种实验验证后指出：「在组织培养中常观察到一种大小不等、形态不同的黑色运动颗粒，它对培养细胞的生长有不良影响，有时甚至导致细胞死亡，并能在一定条件下随培养时间的增长而增加其数量。人们常称这种颗粒为黑胶虫或中毒颗粒，我们取细胞培养用的血清、培养基和其他材料中的黑色运动颗粒，应用光学显微镜、透射电镜、扫描电镜对其形态学进行系统观察；并用显微摄影观察其活动情况；用紫外分光及电泳透析进行生化分析

结果证明：该颗粒为无膜式结构，无蛋白质成分，中性环境下带正电荷，能谱扫描电镜分析为硅复合物，我们称之为硅小体，证明其活动属布朗运动。本文进一步用电感耦合等离子发射光谱分析了培养液及双蒸水中可溶性的硅含量在不同质量的容器及不同时间的变化，证明了硅小体的增多主要来源于培养液对玻璃器皿的侵蚀，或来源于被培养的细胞。

综上所述，不管是黑胶虫到底是什么物质，选择一款高品质的胎牛血清会避免这种情况的一大半，如何选购高质量胎牛血清：

市场上的胎牛血清种类繁多，鱼龙混杂，很多科研工作者，特别是刚接触细胞培养的人，难以分辨胎牛血清质量的优劣。选购胎牛血清请注意以下几点：

一、外观

拿到胎牛血清，先接触的是血清外观，对于缺少细胞培养经验的人来说，外观的判断尤为重要

1、颜色

根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl，实际上，血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响，这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度，良好的操作能降低血清的溶血。

国产血清的采血点很分散，大多是由屠户采血后马上离心收集，所以很少会有溶血，表现出明亮的蜡黄色，当然，国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。

进口胎牛血清或多或少总有点溶血，因为真正的胎牛血清凝血功能差，红细胞容易破裂。

2、沉淀

很多血清客户，会发现进口血清有沉淀，从而怀疑血清的质量问题，这是没有根据的。

血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生，对血清质量没有任何影响，沉淀的产生原因很多，和厂家的加工生产方式密切相关。

国产的血清，大多来自北方，由于价格低廉，保存环境都不好，从采血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融，每次冻融过程，就会析出部分纤维蛋白沉淀，这样，血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”，很少有沉淀产生。

进口的胎牛血清，过滤分装前很少会反复冻融，生产后的成品也是清澈的，但随着时间的推移，血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然，进口的新生牛血清，一般牛龄都在2周左右，血清中的各种蛋白含量明显偏高，生产后血清可能会浑浊，甚至有大量沉淀。

当然，购买回来的血清都是冰冻状态，使用时需要融化，融化过程在温度较低的状态下慢慢进行，否则沉淀相对较多，虽然沉淀并不直接影响血清的质量，但对细胞的显微观察有一定的阻碍。

3、澄清度

进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低，表现为稀薄、清淡，而国产血清，因为绝大多数是新生牛血清，相对而言更加粘稠，颜色略深，这对于初步接触血清的人很难判断，但把两者进行对比，可容易分辨。

二、主要技术指标

目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》，主要指标有以下几点：

1、内毒素

标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分，因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。

2、总蛋白含量

胎牛血清一般范围是30-40mg/ml，数值偏高，说明采血的牛龄偏大，不是胎牛，数值偏低，表明血清可能掺水了。

3、血红蛋白

标准为不高于20mg/dl，颜色越红，数值越高，反之，数值越低。

4、pH

国产血清，大多高于7.5，进口胎牛血清，大多低于7.5，具体原因未知，可能和牛龄有关，这也能用来初步鉴别血清的来源。

5、微生物

包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高，细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制，支原体经过0.1um过滤，大多也能清除。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的，主要是生产环境过程中带入，又无法过滤，很难*清除，但对血清质量影响不大。病原性病毒，特别是BVDV，在国产血清中几乎90%以上都存在，这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一，而进口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白

国产血清的只是定性检测，结果也很不准确，进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能*体现出采血的时的牛龄情况，国产血清，基本都是新生牛的，血清中容易产生IgM，IgG的含量也偏高，进口胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也较低。

7、其它

不管是国产还是进口血清，都是不测抗生素的（无四环素胎牛血清除外）。国外，抗生素的使用很严格，用量也很少，每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低；国内，抗生素的滥用已成了普遍现象，血清中残留很高，对细胞培养极为不利，这是国产血清质量差的根本原因。

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Gibco胎牛血清FBS         10270-106        SOUTH AMERICA     500ML

Gibco优等胎牛血清FBS         10437-028        Mexico   500ML

Gibco优等胎牛血清FBS         10099-141        AUSTRALIA       500ML

Gibco特级胎牛血清FBS         16000-044        USA  500ML

Gibco特级胎牛血清FBS         16000-044        USA  500ML

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Gibco优等胎牛血清FBS         10091-148        New Zealand   500ML

Gibco优等胎牛血清FBS         26140-079        USA  500ML

Gibco热灭活胎牛血清FBS heat inactivated          10082-147        USA  500ML

Gibco热灭活胎牛血清FBS heat inactivated          10100-147        AUSTRALIA       500ML

Gibco超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS  16250-078        USA  500ML

Gibco透析胎牛血清Dialyzed FBS 264000-044      USA  500ML

Gibco活性炭/葡聚糖处理胎牛血清Charcoal Stripped FBS 12676-029        USA  500Ml

Gibco新生牛血清New born calf serum        16010159         New Zealand   500ML

Gibco马血清Horse Serum     16050-122        New Zealand   500ML

Gibco热灭活马血清Heat-Inactivated Horse Serum     26050-088      New Zealand   500Ml