血清10099-141

血清10099-141 2017年这个夏天如何选择高品质，放心使用的血清？慧颖生物与您相伴，在实验过程中助您一臂之力。

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胎牛血清FBS （fetal bovine serum）：心脏穿刺的方法采血。剖腹产胎牛，未接触外界，血清中的抗体补体等对细胞生长的有害成分zui少。

新生牛血清：出生24小时内

小牛血清CS(calf serum)：出生10-14天

马血清HS(horse serum)

常用的血清厂家：GIBCO|SERANA|Bovogen|Gemini|Sigma|PAA|GE Hyclone

常用货号:10099-141|16000-044|26140-079|10099-133|10010-147|10082-147|S-FBS-SA-015|S-FBS-AU-015|900-108|100-500|F2442|SH30084.03|SH30396.03|SH30070.03|SH30068.03等

血清的溶解与保存

1、如果不用，先放置-80 ℃保存。

2、如果要用，可于4 ℃冰箱放置过夜，再在室温溶解。

3、溶解好的血清应立即分装，-80 ℃保存。

4、保存于-80 ℃的血清解冻时应先与4 ℃冰箱放置过夜再在室温溶解。切勿直接放在室温溶解。

细胞传代方法

根据细胞生长的恃点，传代方法有3种：

1．悬浮生长细胞传代

   离心法传代：离心（1000转/分）去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。

   直接传代法：悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除l／2一2／3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。

2．半悬浮生长细胞传代（杂交瘤）

   此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹

打法使细胞从瓶壁脱落下来，进行传代。

3．贴壁生长细胞传代

   采用酶消化法传代。常用的消化液有0.25％的胰蛋白酶液。

细胞冷冻保存

1. 细胞应生长良好，处于对数生长期，密度为80%左右。
   2.注意冷冻保护剂之品质。 DMSO质量要好，应无菌且无色。
   3.  冷冻保存之细胞浓度：一般成纤维细胞1~3 x 106 cells/ml，悬浮细胞 5~10 x 106cells/ml，上皮细胞 2~5 x 106 。

4.冻存液的配方是： 60%无血清培养液 30%血清 10% DMSO

1. 冷冻方法:  4℃ 30-60 分钟---> -80℃ 6H - 隔夜 ---> 液氮长期储存。

之细胞生长减慢

提高血清浓度为15-20%；

提高接种密度；

细胞的离散度；

添加细胞生长因子；

之细胞不贴壁

胰蛋白酶消化过度；

支原体污染；

培养液中无贴壁因子

之细胞传代过程中出现碎片、颗粒、小黑点的原因

排除细胞污染后主要有以下几种可能：

细胞长老了,传代时细胞已100%满度，细胞衰老；

消化时不*，吹打过度；

血清溶解时直接从-80℃放到37 ℃或室温；

以上资料有上海慧颖生物市场部 王丽 编辑整理