RNAiMAX转染试剂（0.1ML，0.3ML）现货

RNAiMAX转染试剂（0.1ML，0.3ML）现货

Lipofectamine™ RNAiMAX（Invitrogen/赛默飞）

专门针对 siRNA、miRNA、stealth RNA 转染，不适合质粒DNA优先选Lip3000，毒性低、 knockdown效率稳定，TCMK-1这类上皮细胞很好用。

货号：13778100  规格：0.1 mL

货号：13778030 规格：0.3 mL

货号：13778075规格0.75 mL

货号：13778150规格1.5 mL

货号：13778500 规格15 mL

储存：4℃冷藏，严禁冷冻！ 冻过直接失效

稀释溶剂：推荐 Opti-MEM（31985062）

配套：转染前换无血清培养基，不要加高浓度血清、抗生素

RNAiMAX转染试剂（0.1ML，0.3ML）现货 操作步骤如下：

Lipofectamine RNAiMAX 正向转染SOP（适配TCMK-1，siRNA敲减）

储存：2–8℃冷藏，禁止冻存；使用前轻轻颠倒混匀，不要剧烈吹打

稀释液：Opti-MEM I（无血清减血清培养基）；转染体系不要加双抗

✅ 孔板参考用量（推荐终浓度10 nM siRNA）

培养板 每孔siRNA RNAiMAX 稀释体系（siRNA/试剂各用Opti-MEM稀释） 孔内基础培养基体积

96孔 1 pmol 0.3 μL 各10 μL，合计复合物20 μL 80 μL

24孔 5 pmol 1.5 μL 各50 μL，合计复合物100 μL 400 μL

6孔 25 pmol 7.5 μL 各150 μL，合计复合物300 μL 1700 μL

一、转染前一天铺细胞（比如：TCMK-1细胞）

1. 用不含qingmeisu/lianmeisu的培养基铺板

2. 转染当日汇合度控制 30%–50%（上皮细胞不要太密）

3. 37℃、5%CO₂过夜贴壁

二、配制转染复合物（室温操作）

每孔分A、B两管配制：

• A管：siRNA + Opti-MEM，轻轻吹打混

• B管：RNAiMAX + Opti-MEM，轻轻吹打混匀

👉 A、B体积相等

1. 将A全部加入B管，轻柔混匀（不要涡旋）

2. 室温静置10–20 min，形成脂质体复合物（不要超过30 min）

三、加复合物入孔

1. 直接把混合好的复合物加到孔里，轻轻前后晃板混匀，不要吹打细胞

2. 放回孵箱 37℃、5%CO₂培养

四、换液与收样时间（TCMK-1参考）

• 可选：转染后4–6 h更换新鲜无抗培养基（降低毒性；不换也可以）

• 敲减检测：24–48 h收RNA；48–72 h收蛋白

⚠️ 重点踩坑提醒（TCMK-1特别注意）

1. 全程避免kangshengsu：双抗会显著增加RNAiMAX细胞毒性，容易飘细胞

2. 血清可以在细胞基础培养基里存在，复合物稀释阶段必须用无血清Opti-MEM

3. 复合物静置不要久放，超过30 min效率下降

4. TCMK-1对高siRNA浓度敏感，优先从10 nM起步优化，不要直接拉很高浓度

5. 阴性对照：NC siRNA + 相同量RNAiMAX，排除试剂本身的细胞效应