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人肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒

  • 产品型号:
  • 产品时间:2018-01-11
  • 简要描述:人肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒
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  • 产品简介

人肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒

使用范围:仅供科研检测,不得用于临床。

保存条件:2-8℃

发货方式:专门快递免费送货上门

产品价格:价格优惠,洽谈!

说明书:说明书随货发送,您也可以直接我司在线销售人员索取。

特点:灵敏性高、特异性强、重复性好

服务:慧颖生物所有的elisa试剂盒均免费代测,全程Elisa实验技术指导,免费代做实验。

人肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒

实验原理:

用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗ITF抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗ITF抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的ITF呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

操作步骤:

实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

  1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

  1. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
  2. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
  3. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
  4. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
  5. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
  6. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
  7. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

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