人Ras同源基因家族成员A（RHOA）ELISA试剂盒

产品名称：人Ras同源基因家族成员A（RHOA）ELISA试剂盒

中文别名: 人Ras同源基因家族成员A（RHOA）ELISA检测试剂盒；人Ras同源基因家族成员A（RHOA）ELISA酶免试剂盒；人Ras同源基因家族成员A（RHOA）ELISA Kit

英文名称：Human Transforming protein RhoA（RHOA） ELISA kit

英文别名：ARH12, ARHA, RHO12, RHOH12, Aplysia ras-related homolog 12|oncogene RHO H12|small GTP binding protein RhoA

规格：96T

种属：人（Human）

待测物名称：ras homolog gene family, member A

缩写：RHOA

检测范围：30pg/ml  -1800pg/ml

试剂盒保存：2-8°C

有效期：6个月

灵敏度：

反应时间：1-5个小时

所需样本量：50-100ul

检测波长：450 nm

人Ras同源基因家族成员A（RHOA）ELISA试剂盒 详细说明：

预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等其它相关液体中RHOA含量

原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Ras同源基因家族成员A（RHOA）水平。用纯化的人Ras同源基因家族成员A（RHOA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入Ras同源基因家族成员A（RHOA），再与HRP标记的Ras同源基因家族成员A（RHOA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ras同源基因家族成员A（RHOA）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人Ras同源基因家族成员A（RHOA）浓度。

1.  标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1800pg/ml， 1200pg/ml，600pg/ml，300pg/ml， 150pg/ml）。

2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.  配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.  加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.  温育：操作同3。

8.  洗涤：操作同5。

9.  显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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