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U-2 OS细胞,人骨肉瘤细胞形态
产品名称:U-2 OS细胞
中文名称:人骨肉瘤细胞
来源:人骨肉瘤
类别:类属于正常细胞
细胞形态:上皮样
生长状态:贴壁生长
培养基:McCoy's 5a 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培养条件:37℃,5% CO2
消化条件:0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液,消化 5-10min
主营细胞:HT-22细胞,HUVEC细胞,A549-luc-puro细胞,U87-MG细胞,SNU-739细胞
消化比例:1:3-1:6
换液时间:2-3 天换液一次
冻存液比例:85%培养基,10%FBS,5% (v/v) DMSO
冻存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
主营细胞:BEL-7404细胞,HCT-116细胞,SK-OV-3细胞,IOSE80细胞,HL-7702细胞
若客户收到2ml小管U-2 OS细胞,人骨肉瘤细胞形态
收到细胞以后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后将小管细胞转移至T25培养瓶,加入5ml左右含FBS的培养基混匀,放入培养箱隔夜培养后查看细胞汇合度:若未超过80%汇合度,换液继续培养,根据情况传代或者冻存。若超过80%汇合度,可直接进行传代(细胞贴壁处理方法)。
1、细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满*培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。从细胞资源中心获得细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。
2、镜下观察:将瓶装的*培养液移入无菌瓶中,留待日后培养用,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培养液,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,按要求比例消化传代。(收到细胞,建议弃去原基培养,使用新鲜*培养基培养)
3、消化方法:
1、将瓶装的*培养液移入无菌瓶中,留待日后培养用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。(收到细胞,建议弃去原基培养,使用新鲜*培养基培养)
2、T25瓶加3ml PBS,洗一次,弃上清,再加1ml消化液消化,显微镜下观察,等细胞*脱离瓶壁分离成单个后,加培养基混匀,离心收集,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6, 1:6-1:8),每T25瓶加培养基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培养。
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