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大鼠同型半胱氨(HCY)ELISA试剂盒

  • 产品型号:
  • 产品时间:2017-12-22
  • 简要描述:凡购买慧颖生物大鼠同型半胱氨(HCY)ELISA试剂盒,提供免费代测服务,收到样本后,三个工作日内出结果。本试剂盒仅供科研使用,不得用于其它。
  • 产品简介

大鼠同型半胱氨(HCY)ELISA试剂盒检测原理:

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 HCY 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 HCY与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠HCY,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,zui后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,HCY浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中HCY浓度。

大鼠同型半胱氨(HCY)ELISA试剂盒操作流程:

  1. 标准品的稀释与加样:标准品按照说明书稀释好五个梯度,各个梯度每孔加样量都为50μl,
  2. 加样:分别设空白孔、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4. 配液洗涤:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用;小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  5. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  6. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  7. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  8. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  9. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应
  10. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

11.计算:

以标准物的浓度为综坐标,OD值为横坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标 准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项:

 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。

 2. 洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。

 3. 板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。

 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

 5. 本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!

 

 

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