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大鼠糖化血红蛋白(HbA1c) ELISA试剂盒

  • 产品型号:
  • 产品时间:2017-11-06
  • 简要描述:上海慧颖生物专业供应大鼠糖化血红蛋白(HbA1c) ELISA试剂盒,另供应人elisa试剂盒、大鼠elisa试剂盒、小鼠elisa试剂盒、兔elisa试剂盒等众多种属,欢迎订购,更多elisa试剂盒、检测试剂盒、elisa试剂盒说明书,正品保证,价格优惠,咨询!/
  • 产品简介

                 大鼠糖化血红蛋白(HbA1c) ELISA试剂盒

            大鼠糖化血红蛋白(HbA1c) ELISA试剂盒使用说明书

实验原理:

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗大鼠 HbA1c 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 HbA1c 与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠 HbA1c ,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,zui后加终止液硫酸,在 450nm 处测 OD 值, HbA1c 浓度与 OD 值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中 HbA1c浓度。

试剂盒组成(2-8℃保存)

酶标 板( Coated Wells )

96 孔

酶标抗体工作液( Enzyme Conjugate

12ml

10 ×标本稀释液( Sample Buffer )

12ml

20 ×浓缩洗涤液( Wash Buffer )

50ml

标准品( Standards ): 2000%/ 瓶

2 瓶

底物工作液( TMB Solution )

12ml

*抗体工作液( Biotinylated Antibody )

12ml

终止液 ( Stop Solution )

12ml

准备试剂与收集血样

1.收集标本:血清、血浆( EDTA )、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存 48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃ 或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。 血清测定前用标本稀释液作 1  20  稀释。

2.标准品液配制:使用前加入 1ml 蒸馏水 混匀,配成 2000% 的溶液 。 设标准管 8 管,*管加标本稀释液 900ul,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在*管中加入 2000% 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出 500ul 弃去。第八管为空白对照。

3.10 ×标本稀释液用蒸馏水作 1:10 倍稀释( 示例: 1ml 浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。

4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例: 1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)

检测程序

1.  加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。

3.  每孔中加入*抗体工作液 100ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 60 分钟。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液 100ul 。将反应板置 37 ℃ 30 分钟。

6.  洗板:同前。

7.  每孔加入底物工作液 100ul ,置 37 ℃ 暗处反应 15 分钟。

8.  每孔加入 100ul 终止液混匀。

9.  30 分钟内用酶标仪在 45 0nm 处测 吸光值。

结果计算与判断

1. 所有 OD 值都应减除空白值后再行计算。

2. 以标准品 200 、 100 、 50 、 25 、 12.5 、 6.25 、 3.12 、 0 % 为横坐标, OD 值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。

3. 根据样品 OD 值在该曲线图上查出相应 HbA1c 含量 即可 。

试剂盒性能

 1.   灵敏度 : zui小的 HbA1c 检测浓度小于 1.5% 。

2. 特异性: 可同时检测重组或天然的大鼠 HbA1c 。 不与 大鼠其它细胞因子有交叉反应。

3. 重复性:板内、板见变异系数均小于10 %。

注意事项

 1.   以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。

  2.   洗涤过程 很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及 OD 值错误地升高。

  3.   板条开封后剩余板条要再封好,保持 板条干燥 。

  4.   本试剂盒宜置 4o C 冰箱保存。

  5.   本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!

 

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