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动物细胞培养,植物细胞培养,复苏细胞,冻存细胞,现货出售208F细胞,大鼠成纤维细胞,价格/来源 简单信息如下:
细胞来源:大鼠成纤维细胞
细胞简介:208F细胞为大鼠成纤维细胞,来源于大鼠成纤维细胞,中文名为大鼠成纤维细胞,正常的细胞形态为上皮样,贴壁生长。
培养基:DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培养条件:37℃ 5% CO2
消化条件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液,消化5-10min
传化比例:1:3-1:6
换液时间:2-3天换液一次
冻存液比例:85%培养基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO
冻存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
细胞纯度:94%
细胞活力:90%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
慧颖生物出售高品质,传代次数少,细胞饱满,光泽度好,来源背景清晰,售后跟踪及时到位,*的208F细胞,大鼠成纤维细胞,价格/来源 @慧颖细胞库出售400多种类细胞株细胞系,20多株耐药株,细胞来源:中科院、美国ATCC、复旦大学、交通大学、DSMZ、UKNCC、BCRC、日本东京大学、日本IKA中心等。一对一服务,随时解决细胞培养中疑难问题,跟踪及时到位,帮您一起完成报告。
操作台的灭菌处理:
1)无菌室及无菌操作台(laminarflow)用紫外灯照射30-60分钟灭菌,70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟。
2)细胞用的培养基如有相同切记不可共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。 (注:实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。)
培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
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苍山冷杉Abies delavayi 2''-O-Coumaroyljuglanin none 67214-05-5 C29H24O12 ≥95%
刺桐Erythrina arborescens 1"-Methoxyerythrinin C 1"-甲氧基刺桐素 C 221002-11-5 C21H20O7 ≥95%
胡椒Piper nigrum 1-(4-Methoxycinnamoyl)pyrrole none 736140-70-8 C14H13NO2 ≥95%
垂盆草Sedum sarmentosum (-)-N-Methylsedridine (-)-N-甲基石榴碱 41447-15-8 C9H19NO ≥95%
垂盆草Sedum sarmentosum (+)-N-Methylallosedridine (+)-N-甲基石榴碱; (alphaS,2R)-alpha,1-二甲基-2-哌啶乙醇 41447-16-9 C9H19NO ≥95%
矮杨梅Myrica nana (+)-S-Myricanol glucoside (+)-S-杨梅醇葡萄糖甙 449729-89-9 C27H36O10 ≥98%
罗汉果Momordica grosvenori Swingle 11-oxo-mogroside V 11-氧-罗汉果皂甙V 105-18 -2 C60H100O29 ≥98%
麻风树Jatropha curcas 13-Methyl-8,11,13-podocarpatriene-3,12-diol 13-甲基-8,11,13-罗汉松科-3,12-二醇 769140-74-1 C18H26O2 Unstable
车桑子Dodonaea viscosa 15-Methoxymkapwanin none 1309920-99-7 C21H28O5 ≥95%
208F细胞,大鼠成纤维细胞,价格/来源 的培养
【初代培养原理】
将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。
仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱(37℃)
材料:动物组织块
试剂:1640培养基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank′s液,碘酒
【初代消化培养法】
(1)准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
(2)布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
(3)处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
(4)剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
(5)消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
(6)分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
(7)计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO23调整。
(8)培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞,纱布塞易生霉菌,每次换液时需要换新塞。
【初代组织块培养法】
《1》剪切:把组织小块置于小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂洗二三次以去掉表面血污,吸静Hanks液,用眼科剪反复剪切1mm3块为止。
《2》摆布:用弯头吸管吸取若干小块,置于培养瓶中,用吸管弯头把组织小块摆布在培养瓶底部,小块相互距离以0.5cm为宜,每一25ml培养瓶底可摆布20~30块。
《3》轻轻翻转培养瓶,另瓶底向上,注意翻瓶时勿另组织小块流动,塞好瓶塞,置36.5℃温箱培养2小时左右(勿超过4小时),使小块微干涸。
《培养》从微箱中取出培养瓶,开塞,46度斜持培养瓶,箱瓶底脚部轻轻注入培养液少许,然后缓缓再把培养瓶翻转过来,让培养液慢慢覆盖附于瓶地上的组织小块。置温箱中静止培养。待细胞从组织块游出数量增多后。再补加培养液。
【传代培养法原理】
细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
【材料和试剂】
1)细胞:贴壁细胞株
2)试剂:0.25%胰酶、DMEM 90%,德国SERANA胎牛血清 Fetal Bovine Serum 10%
3)仪器和器材:倒置显微镜,培养箱、培养瓶、吸管、废液缸等
【操作步骤】
1)吸除培养瓶内旧培养液。
2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。
3)置温箱中2~5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。
4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。
5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。
6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。
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注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。