L929细胞，小鼠成纤维细胞株

L929细胞，小鼠成纤维细胞株

公司所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、治疗。

细胞状态不好解决方法：培养基一次不要配太多，根据用量决定。

细胞外源微生物的污染：细胞不宜长期体外培养，因为外源微生物污染的几率大大提高。易发现和难发现的，影响细胞状态。

建议：实验前冻存一批细胞，隔几个月重新复苏。既保证实验所用细胞代数*，又将外源污染的后果降到zui低。

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相关培养液原料（）

1640培养基（GIBCO,货号11875093） +10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酰胺)+1mM  Sodium pyruvate+10mM   HEPES(gibco.。货号。15630-080)

DMEM高糖培养基（GIBCO,货号11995065）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+4mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸钠1,HEPES(gibco.。货号。15630-080)

E,MEM培养基（GIBCO,货号11095080）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+NEAA(非必需氨基酸)+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸钠）

F12K培养基 （GIBCO,货号11765054）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)

McCoy's 5a培养基（GIBCO,货号16600082）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

L 15培养基（Hyclone,货号SH30525.01）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

DMEM/F12培养基（GIBCO,货号11330032）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

IMDM培养基（GIBCO,货号C12440500BT）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

L929细胞，小鼠成纤维细胞株 步骤：

（一）冻存

1、消化细胞（同实验二），将细胞悬液收集至离心管中。

2、1000rpm离心10分钟，弃上清液。

 3、沉淀加含保护液的培养，计数，调整至5×106/ml左右。

4、将悬液分至冻存管中，每管1 ml。 

5、将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口，封口一定要严，否则复苏时易出现爆裂。

6、贴上标签，写明细胞种类，冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。 

7、按下列顺序降温：室温→4℃（20分钟〕→冰箱冷冻室（30分钟）→低温冰箱（－30℃ 1小时）→气态氮（30分钟）→液氮。 

注意：操作时应小心，以免液氮冻伤。液氮定期检查，随时补充，不能挥发干净，一般30立升的液氮能用1～1.5月。

（二）复苏 

1、准备一个茶缸或1000ml的烧坏，内装2/3杯37℃的温水。 

2、从液氮中取出冻存管、迅速置于温水中并不断搅动。使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。 3、打开冻存管，将细胞悬液吸到离心管中。 4、1000rpm离心10分钟，弃去上清液。 

5、沉淀加10ml培养液，吹打均匀，再离心10分钟，弃上清液。 

6、加适当培养基后将细胞转移至培养瓶中，37℃培养，第二天观察生长情况。

L929细胞，小鼠成纤维细胞株 相关主要产品:

鹌鹑纤维肉瘤细胞株QT6

小鼠骨髓瘤B淋巴细胞株SP2/MIL-6

小鼠胰腺癌细胞株LTPA

小鼠逆转录病毒包装株PT-67

小鼠淋巴瘤细胞株L5178YTK+/-clone3.7.2C

小鼠乳腺癌高转移细胞株MA-891

小鼠胃癌细胞株MFC

鼠肝癌细胞株MM45T.Li

小鼠肝癌细胞株Hepa1-6

小鼠胸腺瘤细胞株EL4

小鼠胶质瘤细胞株9L

小鼠胶质瘤细胞株RAW264.7

小鼠肝癌细胞株hepA1-6

小鼠垂体瘤细胞株AtT20

小鼠乳腺癌细胞株C127

大鼠神经胶质瘤细胞株C6-121

大鼠神经胶质瘤细胞株C6-1752

大鼠神经胶质瘤细胞株C6-64

大鼠神经胶质瘤细胞株C6-70

大鼠神经胶质瘤细胞株C6-D2B

小鼠肺癌Lewis瘤株

小鼠肺腺癌细胞株LA795

小鼠胰腺腺泡细细胞株MPC-83

小鼠胰腺腺泡细胞株MPC-83瘤株

小鼠β胰岛素瘤细胞株RIN-m5F

小鼠乳腺癌细胞株MA891

小鼠自发高乳腺癌细胞株TA2

小鼠宫颈癌细胞株U14

小鼠神经胶质瘤细胞株G422

小鼠腹水瘤S180瘤株

小鼠白血病细胞株C3

小鼠淋巴瘤细胞株YAC-1

小鼠肺上皮细胞株TC-1

大鼠肉瘤细胞株WistarW256

小鼠巨噬细胞株Ana-1

小鼠小胶质瘤细胞株Bv-2

大鼠胰岛素瘤细胞株INS-1

大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383

小鼠单核巨噬细胞株J774A.1

大鼠胰腺癌细胞株DSL-6A/C1

L929细胞，小鼠成纤维细胞株 试剂和器材 

器材：液氮罐、冻存管（塑料螺口冻存管或安瓿瓶）、离心管、吸管、离心机等 试剂：0.25％胰酶、培养基、含保护剂的培养基（即冻存液） 冻存液配制： 培养基加入甘油或DSMO，使其终浓度达5—20%。保护剂的种类和用量视不同细胞而不同。配好后4℃下保存。