IPTG异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（Sigma/Merck）

IPTG异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（Sigma/Merck），订购： 56980388！

中文名称: 异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷

中文别名：异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷,异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖甙

商品名称: Isopropyl β-D-1-Thiogalactopyranoside

英文简称: IPTG

产品别名: Isopropyl β-D-Thiogalactoside

CAS : 367-93-1

产品纯度: Sigma ≥99%, Merck ≥98% 

产品性状: 白色或白色粉末,溶于水后呈清亮无色液体

分 子 式: C9H18O5S

分 子 量: 238.30

保存温度: 2-8°C冷藏保存 ,配制好后保存于-20°C，室温可放置一个月

主要作用：异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）是一种作用*的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用

IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性，当pUC系列的载体DNA（或其他带有lacZ 基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

诱导原理

首先

    E.coli的乳糖操纵子（元）含Z、Y及A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶，此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节 基因I。I基因编码一种阻遏蛋白，后者与O序列结合，使操纵子（元）受阻遏而处于关闭状态。在启动序列P上游还有一个分解（代谢）物基因激 活蛋白（CAP）结合位点。由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区，三个酶的编码基因即由同一调控区调节，实现基因产物的协调表达 。

其次

   在没有乳糖存在时，lac操纵子（元）处于阻遏状态。此时，I序列在PI启动序列操纵下表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合，阻碍RNA聚合酶与P序列结 合，抑制转录起动。当有乳糖存在时，lac操纵子（元）即可被诱导。在这个操纵子（元）体系中，真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞，经β-半乳糖苷酶催化，转变为半乳糖。后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白，使蛋白构象变化，导致阻遏蛋白与O序列解离、发生转录。异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的作用与半乳糖相同，是一 种作用*的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定，因此被实验室广泛应用。

使用方法

    首先把IPTG配制成24 mg/ml（100 μM）的水溶液，并进行过滤除菌后保存。然后在100 ml的琼脂培养基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。当DNA段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化至lacZ缺失细胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培养基，可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组体）。

作用

诱导外源基因的表达，普遍应用于原核表达系统，使其表达量增高，产物稳定，具有易鉴定，易纯化的优点。

注意事项 ：

   ◆培养噬菌体时，Top agar中的添加量为：25 μl/3 ml（24 mg/ml）

   ◆含有IPTG的培养基4℃避光保存，须在1~2周内使用。

包装报价： 产品来自Sigma/Merck公司

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IPTG异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（Sigma/Merck）