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INS试剂盒,人胰岛素ELISA试剂盒说明书,慧颖生物采用科技,纯进口试剂,为保证客户利益,防止市面上假冒伪劣,产品包装统一更新,诚招全国代理商。
产品名称:INS试剂盒,人胰岛素ELISA试剂盒说明书
检测方法:ELISA
检测类型:酶免免疫夹心法
检测范围:见说明书灵敏度:见说明书(以随货英文说明书为主)
检测目标:人
检测时间:小时
样品形式:血清/血浆/细胞培养上清液/其它体液
保存方式:短期4℃/长期-20℃
应用范围:科研用检测试剂
产品特点:重复性好,特异性强,性价比高,线性好;操作简单,精确度高;售前售后完善,随时来实验室现场观看,订试剂盒免费代测。
注明: 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
检测原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被胰岛素(INS)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素(INS)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0 的S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取50μL 加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20 稀释,即1 份的20×洗涤缓
冲液加19 份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5 次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5 次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔先加生物素10μL,再加待测样本50μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B 各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min 内,在450nm 波长处测定各孔的OD 值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD 值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:zui低检测浓度小于0.1 mIU/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 个月
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