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血清沉淀是什么?
血清非人工产品,沉淀出来系自然现象,沉淀主要是纤维蛋白原,其次是盐析出。如磷酸钙等,还有一些danguchun和脂肪酸以及其他蛋白析出物质等
哪些因素血清沉淀会增加?
血清热灭活、37℃培养 、反复冻融、溶解过程中没有摇匀、伽马射线照射、长期存放在 2-8°C、血清加入到RPMI 1640中时、pH升高时、在培养板或培养皿中,培养基的蒸发等等因素都会导致沉淀的增加。
沉淀不会影响其对细胞的促生长作用?
技术人员对此问题有过深入研究证明,血清沉淀对细胞的生长没有影响,但有一个例外:沉淀对巨噬细胞的培养会有一些影响。
沉淀这种现象发生在所有的血清中?
“G*品牌的胎牛血清没有预老化,如果存放在2-8℃,血清中的各种蛋白或酯类有可能会凝聚析出,出现沉淀或混浊. 这种不会影响血清对对细胞的促生长作用.我们建议把血清存放在 –20℃,并避免反复冻融。S*品牌胎牛血清说明书中说: “在融化过程中混浊多絮状沉淀,这种现象对多数血清来说是正常的,并不影响其使用质量。但它影响血清的外观,影响瓶与瓶之间的一致性。
有沉淀出现的血清并不是污染
检测血清是否被污染方法是将血清接种到血酯板上,培养后看是否有菌落形成。在1000x显微镜下,有经验的通过观察细胞液状态和常见细菌的外形即可鉴别,或者通过有无革兰氏染色的细菌,也可以判断血清是否被污染。
如何去除血清中的沉淀?
如想去除这些絮状沉淀物,可将血清分装到无菌离心管中,以400g离心,上清液即可直接加入到培养液中使用。不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为可能阻塞滤膜。
血清溶解过程如何减少沉淀
将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱12-24小时左右使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地轻轻摇晃均匀。切勿将刚刚从-20℃冰箱里拿出来的血清直接放在水浴中,无论室温的水或者37℃的水,因为在水浴中血清迅速融化,很大的温差(-20℃到37℃,温差为57℃)极其容易造成血清产生沉淀。直接放65℃水浴中更是极其残忍的做法,是对血清的亵玩,对科学规则的粗暴践踏!
胎牛血清冻存注意事项
需要长期保存的血清有必要储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时刻切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因而,血清在冻入低温冰箱前,有必要预留一定体积空间,不然易发生污染或玻璃瓶冻裂。大包装的瓶装血清冻结需采用逐渐冻结法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断悄悄摇晃均匀(小心勿形成气泡),使温度与成分均一,削减沉积的发作。切勿直接将血清从-20℃进入37℃融化,温差大的情况下血清容易形成蛋白质凝聚而出现沉积和沉淀絮状物。
血清是否需要热灭活处理?
热灭活是指56℃, 30分钟加热已chedi冻结的血清。加热过程中须规矩摇晃均匀。目的是使血清中的补体成分(complement)灭活。除非有必要,一般不建议做此热处理,因为热处理会形成血清沉积增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有: 平滑肌细胞收缩、 肥大细胞和血小板释放组胺、 增强吞噬作用、促进淋巴细胞和巨噬细胞发作化学趋化和活化。相关研究的使用者可以考虑血清增加热灭活处理。
血清使用浓度是多少?
原则上血清添加量不要太多,通常分为5%、10%、20%几档,部分细胞原代提取时会使用20%血清,大部分细胞正常培养时会使用10%的血清浓度。至于某一株细胞适应什么样的血清浓度,还需要根据细胞特性、实验目的做测试和调校。
PAN P30-3302胎牛血清如何试用
血清开始进行试用时,如果是重新复苏细胞,建议用原培养体系进行细胞复苏,待细胞状态进入zuiyou状态后再进行测试。测试时不建议直接100%直接换成新血清体系进行培养,而应该按照比例进行梯度替换(例如,shou次换液按照新旧体系1:3,第二次换液1:1,第三次换液3:1,而后wanquan替换。对于一些对培养体系比较敏感的细胞,可以进一步优化替换比例。)通过这种方法可以避免细胞因环境改变而出现应激或者异常造成不必要的损失。
血清在4度冰箱能放多久?对细胞有何影响呢?
根据文献显示血清和血浆在4℃条件储存2小时,血清中的成分就会发生变化,所以建议用户在使用血清要分装成自己常用的规格,建议现配现用。如果不能实现现配现用的话,配好的培养基在4℃保存的时间不要超过1周,如果期间使用频次较高或恢复室温次数较多时,能够保存的时间还会减少。