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Gibco马血清 26050-088,热灭活

  • 产品型号:
  • 产品时间:2017-04-13
  • 简要描述:慧颖生物热销 Gibco马血清 26050-088,热灭活 库存现货,*,当天可发货,冷冻运输,保证品质 保证行货。欢迎您致电咨询Gibco马血清价格以及产品介绍等。
  • 产品简介

Gibco马血清 26050-088,热灭活

货号:26050-088

规格:500ml

品牌:信息兰源

Gibco™ sera offers excellent value for basic cell culture, specialty research, and specific assays, earning the trust of researchers with consistent quality and award-winning support that helps meet your research needs and budget requirements

 

Sera Category: Specialty

Origin: New Zealand.

EIA tested (negative) serum from a donor herd.

This reagent is classified as a medical device in several countries. If it is not regulated as a medical device in specific region, it should be used for laboratory use only.

Country of Origin:

New Zealand

Product Line:

Gibco??

Product Size:

500 mL

Serum Treatment:

Heat-Inactivated

Species:

Horse竅Еquine

Shipping Condition:

Dry Ice

 

储存温度:-20°C

有效期:五年

 

一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。

 

如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:

 

(1)细胞生长过老,破碎的细胞残骸;

 

(2)血清质量不好,反复冻融的结果;

 

(3)配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;

 

(5)培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。

 

 (4)配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;

 

细胞培养中如何防止黑点生成

 

(1) 尽可能地减少血清冻融次数。

 

(2) 培养基无需37℃水浴。

 

(3) 培养基保持*PH值7.0- 7.2。

 

(4) 严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗。

 

(5) 掌握细胞传代的*时机,细胞切勿生长过老。

 

血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?

 

沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。

Gibco马血清 26050-088,热灭活 通常作为补充成分添加在基础培养基内使用。它能够提供各种大分子蛋白,小分子量营养,水溶性成分的转运蛋白,和其它一些细胞在体外所必需的成分,如激素和附着因子。血清可以结合或中和一些生长因子中的有毒成分,并提供培养基的缓冲能力。细胞培养时血清的添加依赖于基础培养基的化学组成,培养细胞的类型,及所用的培养系统。

我们在提供细胞培养基、平衡盐溶液、无血清培养基和试剂的同时,还提供高品质的血清。我们对血清制备进行全过程监管。从血清收集到zui终产品检验和内部稽核的每一个步骤,我们都采用设备和标准操作程序,以确保整个过程中每个环节的产品质量。对整个过程的控制可以保证产品的持续高品质,降低不同批次的差异。

处理:全部血清:收集的血液均在冷藏条件下处理。血清和血分离后立即将血清合并并冷冻。只有符合我们的检测标准的血清才被接受作进一步处理。

热灭活血清:热灭活是在56℃水浴中严格控温30分钟。透析血清:用10,000截留分子量的透析膜在0.15M的NaCl中进行透析,直到葡萄糖水平低于5mg/dl(用邻甲苯胺测试法检验)。γ射线照射血清:可按客户要求对血清进行γ射线照射。通过γ射线照射以灭活各种动物血清(包括胎牛血清、新生牛血清、猪血清和马血清)中的病毒和支原体的方法已经得到证实。研究证实照射剂量在30-45kGy为宜。血清在此照射后物理化学特性和细胞培养表现没有变化。装瓶:粗血清须通过一系列的过滤才成为成品。zui后的过滤步骤包括使用0.2um和0.1um的无菌过滤。胎牛血清须通过三次0.1um过滤,其他血清须通过0.2um过滤。zui终产品的质量控制:我们采取以下方法对每一批次的产品选取一定数量的样品进行质量控制分析:

化学检测:使用低温凝固点的方法检测渗透压,以保证符合产品规范。我们每天使用国家标准的技术研究所标定的标准溶液对我们的渗透压检测仪器进行校准。同样每天使用国家标准技术研究所标定的标准溶液对pH计进行校准。

使用电泳图谱鉴定血清的整体性质。样品被转移到硝酸纤维素基质中,并在缓冲体系内迁移。条带经染色、清洁、干燥后用密度仪进行扫描,以检测白蛋白和球蛋白组分的相对浓度。为证实是否在适当的条件下进行采血和处理,使用修饰的Fleming方法对血红蛋白进行分光光度检测。

随着动物年龄的增加,血清总蛋白含量也相应地提高。使用自动化的Biuret方法进行总血清蛋白的检测,以确认动物年龄并验证符合产品规范。使用色度计在不同波长下检测样品和Biuret试剂混合波的吸光度。自动计算结果后,与标准曲线比较,即可得到蛋白值(克/公升)。

稳定性检测程序:在每一个标记为体外诊断的产品上显示的效期表明了这个产品具有多长时间的效能。我们的稳定性程序确定和证明了产品效期。我们定期监测批量产品,确定产品在推荐贮存条件下具有可接受效果的时间长度。

微生物学检测:所有血清使用Barile&Kern的大体积方法检测支原体。在推荐方法的检测范围内检测结果是准确的。样品至少应该在肉汤中合并培养3个星期,同时要在琼脂平板上进行不少于4次传代培养。在有氧和厌氧(95%氮,5%CO2)条件下,平板在36±2℃下孵育。在检测过程中,每周对琼脂平板进行一次微生物生长情况检验。使用Dienes染色法对怀疑被污染的琼脂平板进行支原体菌落的检测。然后,对平板进行再次镜检。对孵育肉汤瓶要定期进行浊度和pH值变动的检测。在推荐方法检测范围内,所有血清也要使用Hoechst荧光DNA染色法进行不可在肉汤中培养的支原体(包括M.hyorhinis属)检测。

病毒检测:已知无外来物质的细胞培养基须经过在包含15%测试血清的生长培养基中进行为期21天的三次传代培养。使用对照培养基和已知对外来物质为阴性的血清平行地维持阴性对照培养。整个期间,检测所有的培养情况,以便发现是否存在病毒诱发的细胞形态改变或致细胞病变效应。在14至21天的培养期间,对含有检测血清的平行培养瓶按下面标准病毒检测方法进行评估。

将其中一瓶检测细胞用胰蛋白酶消化,然后把细胞分别加入到总面积为6cm 2 的六室载玻片上。同时准备阴性对照载玻片。在检测培养的单室载玻片上加入牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛细小病毒、牛腺病毒、狂犬病毒和呼肠病毒的染色剂,作为单个的阳性对照。再经过7天培养(总共21天),利用荧光抗体技术检测病毒。

通过对检测培养进行苏木精伊红染色,观察致细胞突变效应(CPE)或其他病毒诱导效应。检测细胞是否存在CPE效应、内含物、多核体或其他异常效应。

内毒素检测:我们用阿米巴变形细胞溶解物(LAL)凝胶法来检测胎牛血清的内毒素含量。

效能检测:
对每一批次的胎牛血清,我们都进行下述培养效能检测。选择血清zui重要的标准是其支持特殊细胞的生长能力。因此,除了保证血清通过严格的品质控制,我们也同时在实验室条件下对血清的三个重要的培养效能进行检测:克隆效率、贴壁效果和二倍体成纤维细胞生长促进。

克隆效率分析:克隆效率实验分析每一批胎牛血清促进小鼠骨髓瘤细胞及其衍生的杂交瘤细胞的克隆和生长能力。下列产品
经验证可用于该实验:
Sp2/0-Ag14(ATCC #CRL 1581)
P3x63-Ag8.653(ATCC #CRL 1580)

每一批胎牛血清都要分别在复制微量滴定平板上加入两种血清浓度和两种细胞接种量(10%血清和1cell/孔,4%血清和5cells/孔)的情况下进行分析。克隆分析结果除以已确定的参照血清值得以归一化。在许多日常杂交选择程序中具有代表性的是高浓度的血清,而低浓度血清在设计血清批次细微差异放大检测中有更为严格的测试。严格的1cell/孔测试是模拟单一杂交选择的实验室条件。为每一批次胎牛血清提供的分析证明报告中的克隆效率值为两次测试条件下的平均值。

克隆分析法:克隆分析法是在复式96孔板中加入两种胎牛血清浓度(10%v/v)和(4%v/v)和两种接种量的情况下进行的。每一次化验中,同时测量前期已验证合格的一批胎牛血清,并将此测量值作为内部参考标准。
克隆分析按下述方法进行:

1.Sp2/0-Ag14(sp2)和P3x63-Ag8.653(653)在含有10%的胎牛血清的RPM1640中通常保持对数生长期。在显微镜下,利用台盼蓝排除法对活细胞进行计数。

2.用RPM1640培养基将储备细胞悬浮液进行连续稀释,使其达到预期的25cells/ml和5cells/ml接种浓度。准备含有参照或测试胎牛血清的RPM1640培养基。将这种密度的细胞分配到各个分析生长培养基体积为0.2毫升的孔中,使其分别平均含有5个和1个细胞。

3.将96孔板放入36±2℃,4-6% CO 2 的潮湿培养箱孵育约10至15天。

4.在孵育期间,用肉眼观察平板并对用于克隆的孔进行计数。克隆效率按下列方法计算:克隆效率=(阳性孔平均数/孵育孔总数)×100%

5.每一批次胎牛血清维持指示剂骨髓瘤细胞克隆效率的定量按照以下方法测得的相对克隆效率(RCE)进行归一化:RCE=检测血清的克隆效率/对照血清的克隆效率贴壁效率分析:贴壁效率分析是利用已转型的人类细胞系来检测每一批血清促使持续贴附细胞系的生长能力。选择已被验证可以检测贴壁效率的细胞系A549(人肺肿瘤细胞,ATCC#CCL,185),是因为它可以区分一批血清维持细胞贴壁和繁殖能力的细微差异。

每一批次胎牛血清都要在两种血清浓度和两种细胞接种浓度下(10%血清和100cells/孔,4%血清和200cells/孔)测试三次。在36±2℃,4-6% CO 2 的潮湿培养箱孵育约10至14天,对被染色的细胞菌落进行计数即可得到其贴壁效率。将结果除以参考的对照血清得以归一化。通过两种血清浓度的测试,可以验证该批次血清在减量和标准水平下维持生长的能力。为每一批次胎牛血清提供的分析证明报告中的贴壁效率值为两次测试条件下的平均值。

贴壁分析法:使用贴附分析检测上述每一批测试血清。这种分析法针对每一个血清样品使用一个6孔板(每室9.6cm 2 ),并可以对三个孔的数据进行平均处理。每一次化验中,同时测量前期已验证合格的一批胎牛血清,并将此测量值作为内部参考标准。

贴附分析按下述方法进行:

1.A549细胞系用含有10%胎牛血清的DMEM培养基,在36±2℃,以亚融合密度下进行培养。

2.含10%(v/v)和4%(v/v)血清的DMEM由分别在22.5毫升和24毫升DMEM中加入2.5毫升和1毫升胎牛血清配制而成,zui终有效体积为25毫升。将5毫升含血清培养基分别加入6孔板的每一个孔中。

3.A549培养细胞先经过胰蛋白酶消化,测定活细胞数,然后稀释细胞悬浮液至2,000cells/ml。

4.将0.1毫升细胞悬浮液加入200cells/孔室中,0.05毫升悬浮液加入100cells/孔室中。平板混合后放入36±2℃,5%CO 2 的潮湿培养箱孵育约10至14天。

5.孵育后,取出平板,去除生长培养基,用亚甲基兰-甲醇溶液对菌落进行染色。

6.计算菌落形成,然后按下述方法计算贴壁效率:%贴壁效率=每孔菌落平均数/每孔孵育活细胞平均数×100

7.为方便比较,将测得的贴壁效率数值除以每批检测血清的相对贴壁效率(RPE)得以归一化:RCE=检测血清的贴壁效率/参照血清的贴壁效率二倍体成纤维细胞生长:促进生长分析用于检测每一批胎牛血清维持难培养的人二倍体成纤维细胞长期生长的能力。

下列细胞系经认证可用于该实验:

WI-38(人二倍体肺成纤维细胞,ATCC#CCL 75)

WI-38细胞在含5%胎牛血清的低密度(2X10 5 /瓶)复式25-cm 2瓶中孵育,并进行为期三个连续7天的传代培养。在每一个培养期,细胞都从初始孵育密度开始传代培养。压力分层率、成倍繁殖数量和减量血清浓度是每批次促进难培养二倍体细胞的生长血清的严格测试指标。通过连续三代培养以减少前一次生长培养基的残留影响,从而保证得到检测批促进生长能力的真实结果。为每一批次胎牛血清提供的分析证明报告为第三次传代培养每复式培养瓶细胞数的平均值。将检测值除以参考对照值得以归一化。

二倍体成纤维细胞生长分析法:培养数代WI-38人类二倍体肺成纤维细胞,计算每一代的细胞总数。此项检测所挑选出的胎牛血清批号能维持难以生长细胞、贴壁性细胞、正常的细胞株生长及存活。

1.准备含5%检测血清或已验证合格的参照血清生长培养基,基础生长培养基为含L-谷氨酰胺的HBME:EBME(1:1)。按要求,在每一次流量变化和分析过程中进行传代培养时需配制含5%血清生长的培养基。

2.在低代培养水平时,将2X10 5 WI-38细胞加入各个含9.5毫升生长培养基的复式25-cm 2 培养基中。在不拧紧瓶盖的情况下,将培养瓶放入4-6%CO 2, 36℃±2℃环境中,保持24小时。然后拧紧瓶盖,将培养瓶放在36℃±2℃下孵育7天,在第2天或第3天全部更换培养基。

3.在第7天,用胰蛋白酶对每一个含参照或检测血清的复式瓶中的细胞进行消化得到一定数量细胞,然后合并并计数。将2x10 5 WI-38细胞加入含有新鲜生长培养基(已加入了与上一代同一批次的参照或检测胎牛血清)的新的复式25-cm 2 瓶中,进行细胞传代培养。按第2步所述,将培养瓶进行平衡并孵育。

4.如上所述经过三代连续分析,在每一代结束时计算每一批参照或检测血清的每瓶细胞平均数。zui后一代培养的各批检测血清实验中的相对生长率(RGR)作为参照血清实验中获得的细胞生长率分子:

%RGR=检测血清实验中每瓶平均细胞数/参照血清实验中每瓶平均细胞数X100S f9细胞生长促进分析。通过昆虫分析可以保证您购买的胎牛血清批次可以维持S f9细胞的生长。收到产品后,您需要做的就是混匀血清,在56℃下热灭活30分钟。这种分析法也可以用于乳白蛋白水解产品、酵母和其它生长辅料作为原料的生物效能分析。该分析法的准确性取决于是否用常规的细胞培养方案进行培养。用台盼蓝染色排除法测得的细胞活性至少不低于80%。

细胞生长分析法。

1.使用含10%检测或参照热灭活胎牛血清的已验证的Grace昆明培养基配制完全检测培养基。

2.将储备Sf9细胞加入50毫升离心管中,在50Xg下离心5分钟。然后将每支试管的沉淀物重新用含10%的检测或参照热灭活胎牛血清完全培养基配制成悬浮液。

3.反试管颠倒几次,然后每支试管倒出1毫升样品。用台盼蓝染色排除进行活细胞计数。

4.如果活性≥80%,把试管再颠倒几次并取出0.25毫升样品。然后用Coulter计数器进行细胞计数。

5.将细胞加入Erlenmeyer瓶中,使其zui终细胞浓度为2.75X10 5 cells/ml。孵育后,再一次进行细胞计数,以保证细胞密度为2.5X10 5 至3.0X10 5 cells/ml。

6.将培养瓶放到摇床上,在27℃±1℃、80-90rpm条件下孵育96小时。

7.从每一培养瓶中分别取出0.25毫升样品,用Coulter计数器进行计数。同时取出一定量的样品进行细胞活性检测。

8.将检测细胞密度与参照细胞密度相比即可得到相对细胞密度(RCN)。

噬菌体检测:我们利用溶菌斑分析法来检测是否存在噬菌体。从每一批血清中取具代表性的样品加入胰蛋白酶磷酸琼脂中,并在其加入含有噬菌体敏感的大肠杆菌悬浮液(C-3000或K-12)。然后,混合物会在胰蛋白酶磷酸琼脂平板上分层,在36±2℃环境下孵育约24小时后,观察平板上溶菌斑的形态。

生化特征检测。

碱性磷酸酸酶

葡萄糖

重碳酸盐

高密度脂蛋白(HDL)

胆红素(总)

乳酸脱氢酶(LDH)

血脲氮(BUN)

低密度脂蛋白(LDL)

BUN/肌氨酸酐比钾

磷(无机)

血清谷草转氨酶

氯化物

胆固醇

总铁结合力

肌氨酸酐

转铁蛋白

γ-谷氨酰基转移酶

甘油三酸酯(TG)

尿酸

 

血红蛋白检测:所有批次的胎牛血清我们都进行了血红蛋白的检测,血红蛋白含量低于《中国生物制品主要原辅材料指控指标》(2000年版)公布的指标。

效能检测:其它血清

新生牛血清。检测新生牛血清维持超过三代VERO细胞生长的能力。在每一个培养期,细胞都从初始孵育密度开始传代培养。可将所得结果与使用含有已知特征的参照血清对照生长培养基获得的平行结果进行比较。

马血清。每一批马血清被检测维持在含有检测批血清的对照培养基上Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤)细胞生长的能力。可将所得结果与使用含有已知特征的参照血清对照生长培养基获得的平行结果进行比较。

血清的使用与储存:正确的使用及保存血清,才能使血清发挥应有的作用。

1. 储存条件:血清一般储存于-20℃,同时应避免反复冻融。购买大包装的血清后,首先要灭活处理,然后分装成小包装,储存于-20℃,使用前融化。融化时先置于4℃。融化后的血清在4℃不宜长时间存放,应尽快使用。

2. 使用浓度:自从有了合成培养基,血清就是作为一种添加成分与合成培养基混合使用,使用浓度一般为5-20%,zui常用是10%。过多血清容易使培养中的细胞发生变化,特别是一些二倍体的无限细胞系,迅速生长之后容易发生恶性转化。

慧颖生物新到GIBCO澳洲胎牛血清,GIBCO北美特级胎牛血清,Hyclone澳洲胎牛血清,BOVOGEN澳洲胎牛血清,SERANA胎牛血清,SIGMA特级胎牛血清,Gemini胎牛血清,SIGMA人AB胎牛血清,GIBCO 二代新型羊水培养基 ,美国SBI无外泌体血清大量到货 价*,更多礼品相送!

胎牛血清FBS S-FBS-SA-011 SOUTH AMERICA 100ML 1100

胎牛血清FBS S-FBS-SA-015 SOUTH AMERICA 500ML 2500

胎牛血清FBS S-FBS-US-015 USA 500ML 4800

超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS S-FBS-SA-055 SOUTH AMERICA 500ML 5200

透析胎牛血清Dialyzed FBS S-FBS-US-065 USA 500ML 5800

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清Charcoal Stripped FBS S-FBS-AU-045 AUSTRALIA 500ML 5800

胎牛血清FBS SFBS SOUTH AMERICA 500ML 2600

胎牛血清FBS SFBS AUSTRALIA 500ML 6000

新生牛血清New born calf serum SNCS New Zealand 500ML 1300

胎牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML 3200

胎牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML 3200

胎牛血清FBS c2027050 SOUTH AMERICA 500ML 2600

优等胎牛血清FBS 10437-028  Mexico 500ML 3200

优等胎牛血清FBS 10437-028  Mexico 500ML 3200

优等胎牛血清FBS 10437-028  Mexico 500ML 3200

优等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000

优等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000

优等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000

特级胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800

特级胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800

特级胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800

优等胎牛血清FBS 26140-079 USA 500ML 3600

优等胎牛血清FBS 26140-079 USA 500ML 3600

热灭活胎牛血清FBS heat inactivated 10082-147 USA 500ML 5600

热灭活胎牛血清FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML 14239

热灭活胎牛血清FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML 14239

超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS 16250-078 USA 500ML 6000

透析胎牛血清Dialyzed FBS 264000-044 USA 500ML 6800

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清Charcoal Stripped FBS 12676-029 USA 500Ml 6800

新生牛血清New born calf serum 16010159 New Zealand 500ML 1035

马血清Horse Serum 16050-122 New Zealand 500ML 909

热灭活马血清Heat-Inactivated Horse Serum  26050-088 New Zealand 500Ml 1069

胎牛血清FBS Sv30087.01 SOUTH AMERICA 100ML 800

胎牛血清FBS Sv30087.02 SOUTH AMERICA 500ML 1800

优等胎牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML 5800

优等胎牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML 5800

优等胎牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML 5800

特级胎牛血清FBS SH30396.03 Canada 500ML 3900

特级胎牛血清FBS SH30396.03 Canada 500ML 3900

特级胎牛血清FBS SH30070.03 USA 500ML 3900

特级胎牛血清FBS SH30070.03 USA 500ML 3900

特级胎牛血清FBS SH30070.03E USA 500ML 5600

特级胎牛血清FBS SH30070.03E USA 500ML 5600

标准胎牛血清FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML 2800

标准胎牛血清FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML 2800

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清Charcoal Stripped FBS SH30068.03 USA 500ML 6000

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清,热灭活,Charcoal Stripped FBS SH30068.03HI USA 500ML 6000

新生牛血清New born calf serum SH30406.01 New Zealand 500ML 1300

马血清Horse Serum SH30074.03 USA 500ML 980

胎牛血清FBS A15-101 EU 500ML PAA

胎牛血清FBS A15-151 EU 500ML PAA

胎牛血清FBS  04-001-1ACS SOUTH AMERICA 500ML BI

胎牛血清FBS  F2442 USA 500ML SIGMA

胎牛血清FBS 100-908 SOUTH AMERICA 500ML Gemini

胎牛血清FBS 100-700 AUSTRALIA 500ML Gemini

胎牛血清FBS 100-500 USA 500ML Gemini

 

关于使用中的常见问题

1.保存血清的办法?
我们建议血清应保存在-5℃至-20℃。若你一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

2.如何解冻血清才不会使产品质量受损?
我们建议您将血清从冷冻箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

3.血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
血清中沉淀物的出现有许多原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性造成的;而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管中,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。

4.何谓热灭活?有必要做热灭活吗?
一般以56℃,30分钟水浴来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活性,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经过处理的血清对细胞生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。
而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热灭活这一步。如此以来,不但节省您宝贵的时间,更确保您血清的质量!

5.如何避免沉淀物的出现?
我们建议您在使用血清的时候,注意正确的血清解冻步骤,并尽量避免灭活血清及长时间的将血清置于高温环境中。

胎牛血清,小牛血清和新生牛血清三种之间的区别:

这三种血清的成份,总体没有什么明显差别,只是有一些成分与其生存环境有关,如上述有人说的抗体等很少。此外,因生长发育的需要,有些成分在小牛出生后会发生一些变化。不过还没有搞清楚它与其它的血清之间的差别。有一点可以肯定,胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛血清中的含量有差别。

胎牛本身生活在一个洁净环境当中,其血清与外界隔绝,只要生产工艺科学规范,其质量肯定要新生牛和小牛要好。

血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。

胎牛血清是品质zui高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分zui少。

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