9L细胞，小鼠胶质瘤细胞株

公司提供2种形式的9L细胞，小鼠胶质瘤细胞株：

一种是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，-80C也不是细胞储存的方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；再者干冰运输需要额外添加运费(顺丰)。

另一种是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，运费较低(联邦或顺丰)。

上海慧颖生物科技有限公司坐落于美丽的嘉定南翔镇，2014年获得澳洲BOVOGEN产品代理权，2015年获得德国SERANA产品总销售权，为国内科研机构提供高品质动物血清和蛋白产品。

慧颖生物为完善的产品供应渠道和售后服务。我们力求工作*，在处理客户的咨询、订购、到货、售后服务、等方面追求更专业、更快捷、更及时。

上海慧颖生物的经营原则是“质量*，诚信*”，以“质量是企业的生命，诚信是经营的资本”为警醒，严把所售出商品的质量关，不做任何有损顾客利益的事情。

一直以来慧颖生物都为广大科研工作者的工作提供材料或者是研究条件，我们是依托广大科研工作者的信任才能发展至今，并且与广大科研者的科研工作一直成长，我们对此一直非常感谢众多的新老顾客，如今又是一年的试剂购买旺季，我们素尔生物也是为了感谢并且回馈广大新老顾客，特推出素尔热卖动物血清，确保正品，确保质量稳定，争取批次间差异降到zui小，真正的让您感到物有所值。素尔生物在此希望广大科研工作的工作可以步步皆高，生活如意幸福。

慧颖细胞库400种类细胞株细胞系，20多株耐药株，超低折扣，种类涵盖：成纤维细胞 长尾绿猴胚胎细胞 长尾绿猴肾细胞 小鼠乳腺癌细胞 人膀胱癌细胞 人T细胞白血病细胞 人肾细胞腺癌细胞 人肾透明细胞腺癌细胞 人甲状腺癌细胞 卵巢癌细胞 干细胞 结肠癌细胞 胃癌细胞 乳腺类细胞 等

以下为购买细胞系后的售后小知识：

1、CO2 培养箱之水盘如何保持清洁？

定期（至少每两周一次） 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之。

2、为何培养基保存于4 ℃ 冰箱中， 颜色会偏暗红色， 且pH值会越来越偏碱性？

培养基保存于4 ℃ 冰箱中， 培养基内之CO2 会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂（通常为phenol red） 的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果， 将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时， 可以通入无菌过滤之CO2， 以调整pH 值。

3、各种细胞培养用的dish，flask是否均相同？

不同厂牌的dish 或flask， 其所coating 的polymer 不同， 制造程序亦不同， 虽对大部分细胞没有太大之影响， 惟少数细胞则可能因使用厂牌不同之dish 或flask 而有显著之生长差异。

4、购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？ 购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？

研究人员在细胞培养时出现存活率不佳， 常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后， 加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80℃太久。

我公司出售Elisa试剂盒，一抗，二抗，动物血清，细胞株细胞系，标准品，生化试剂，日本三菱厌氧罐及安宁包系列，GE填料以及凝胶系列产品，质粒以及质粒搭建。

一个合格的质粒含有以下组成部分：

复制起始位点Ori：即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点，而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。

抗生素抗性基因：可以便于筛选或检测，如Amp+ 、Kan+。

多克隆位点MCS：克隆携带外源基因片段。

P/E：启动子/增强子。

Terms：终止信号。

加poly(A)信号：可以起到稳定 mRNA 作用。

 如何阅读质粒图谱：

*步：首先看 Ori 的位置，了解质粒的类型（原核/真核/穿梭质粒）。

第二步：再看筛选标记，如抗性，决定使用什么筛选标记。

--Ampr   水解β-内酰胺环，解除氨苄的毒性；

--tetr   可以阻止四环素进入细胞；

--camr   生成氯霉素羟乙酰基衍生物，使之失去毒性；

--neor(kanr)   氨基糖苷磷酸转移酶 使G418（长那霉素衍生物）失活；

--hygr   使潮霉素β失活。

第三步：看多克隆位点（MCS）。它具有多个限制酶的单一切点，便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入，会导致某种标志基因的失活，从而便于筛选。MCS决定了能不能放置目的基因以及如何放置目的基因。

第四步：再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。一般来说，外源DNA片段越长，越难插入，越不稳定，转化效率越低。

第五步：是否含有表达系统元件，即启动子－核糖体结合位点－克隆位点－转录终止信号，这是用来区别克隆载体与表达载体。在克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用哪种载体，要以实验目的为依据。

启动子：促进DNA转录的DNA序列，这个DNA区域常在基因或操纵子编码顺序的上游，是DNA分子上可以与RNApol特异性结合并使之开始转录的部位，但启动子本身不被转录。

增强子/沉默子：增强子为真核基因组（包括真核病毒基因组）中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控序列，其作用与增强子所在的位置或方向无关（即在所调控基因上游或下游均可发挥作用）。/沉默子：负增强子，负调控序列。

核糖体结合位点/起始密码/SD序列（Rbs/AGU/SDs）：mRNA有核糖体的两个结合位点，对于原核而言是AUG（起始密码）和 SD序列。

转录终止顺序（终止子）/翻译终止密码子：结构基因的zui后一个外显子中有一个 AATAAA的保守序列，此位点down-stream有一段GT或T富丰区，这2部分共同构成poly(A）加尾信号。

为什么质粒图谱上有的箭头顺时针有的箭头逆时针？那其实是代表两条DNA链，即质粒是环状双链 DNA，它的启动子等在其中一条链上，而它的抗性基因在另一条链上。

如何选择载体

把目的基因通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具（交通工具）携带外源基因进入受体细胞，这种运载工具就叫做载体（vector）。基因工程所用的vector实际上是用来携带目的基因片段进入受体细胞的 DNA。

选择载体主要依据构建的目的，同时要考虑载体中应有合适的限制酶切位点。如果构建的目的是要表达一个特定的基因，则要选择合适的表达载体。

产品名称：9L细胞

中文名称：小鼠胶质瘤细胞

种属：小鼠

生长状态：贴壁生长|悬浮生长|半贴壁

细胞形态：上皮样|成纤维样|圆形|球形|梭形|不规则形态

周期：冻存细胞3-4个工作日发货，复苏细胞1-2周发货

质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，超低折扣价格，无细菌、真菌、支原体污染。

细胞到达客户手中，出现任何问题（人为或者非人为），导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

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9L细胞，小鼠胶质瘤细胞株 细胞吹打经验之谈：

急速的反复吹打肯定容易产生泡沫，这对细胞不利，所以我们要尽量避免。在操作时尽量选用较大口的吸管，吸液时先将吸管内空气排空，再深入液面以下吸液，吹打细胞时，尽量沿着壁吹出液体，操作轻柔，就可zui大程度避免泡沫的产生！

1.有一些细胞可以不用消化液就能够吹打下来。个人认为能不用消化液是的。譬如巨噬细胞。一直维持巨噬细胞，每次传代都不用消化液，吹打的时候一般会用瓶内未换的剩余旧培养液，这样比用新的培养基可以减少点泡沫的生成。当然这个一定要求原培养基未被污染。

2. 吹打的时候我们都知道要一点挨着一点吹，这样不会漏掉地方。而每次都会首先沿着两条对角线的方向吹打，然后再按照横着或者是竖着吹打。这样就可以比较容易把细胞吹下来，因为首先细胞的各个方向都受力了，而且比较均匀，细胞比较容易下来，而且对细胞形态的维护比较好。

3.对胶头滴管的要求。胶头滴管头部是做成弯曲45度角的形状，一般都是自己用止血钳夹住头部在酒精灯上烧弯。发现，如果吹打的时候，滴管的头部边缘如果是和吹打平面平行的话，反而容易产生泡沫，贴在底部吹，也容易产生泡沫，是能够有一个角度顺着你吹打的方向和滴管*。并且稍微远离吹打面，这样滴管内的液体容易流出，阻力会减小，就不会产生那么多的泡沫了。

4.控制吹打的节奏，急速地吹打会很快地产生泡沫，用力越大，越容易产生。是能够把握住自己的力度和节奏，有条不紊的吹打。是以自己拿滴管用手的轻松程度为准，如果刚吹几下很快就累的话，那就证明是节奏过快。吹完都不累的话那就是太慢力度也不够。一般在吹完一遍时指头发困会比较好。这样的节奏能够比较快速而且有效地完成。

觉得zui关键的操作是不要吹打到底。

培养细胞多年，避免气泡产生要注意以下两点：

1 吹打用的培养基不能太少，如果只有1-2mL，气泡难以避免；

2 吸管每次打出液体后立刻深入液面下吸取液体。

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