猪近端肾小管细胞，LLC-PK1细胞，形态/培养

库存现货：猪近端肾小管细胞，LLC-PK1细胞，形态/培养全国各地均可发货，全国统一价格，运输形式：复苏、冻存以及全血清包被（2ML管子）。

产品名称：LLC-PK1细胞

中文名称：猪近端肾小管细胞

来源：Hampshire猪肾

形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

培养基：M199 90%, Fetal Bovine Serum 3%

培养条件：37℃ 5% CO2

消化条件：0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液，消化5-10min

传化比例：1：3-1：8

换液时间：2-3天换液一次

冻存液比例：85%培养基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

冻存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

活力：91％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

慧颖生物提供400多种细胞系细胞株,以及相应的细胞学实验服务:血管新生、traswell、划痕实验、细胞迁移、克隆形成、细胞凋亡、细胞增殖、细胞周期等。另有：示踪细胞、稳定细胞株构建、细胞代感染、筛药细胞株产品、筛药细胞株定制、pathway研究细胞、STR分型鉴定，细胞染色等技术服务提供。咨询： ！

猪近端肾小管细胞，LLC-PK1细胞，形态/培养  细胞传代培养技术：

细胞复苏

1. 将冻存的细胞取出后迅速放入37℃水浴中，并不时摇动，在一分钟内使其*融化

2.将细胞吸出放入有培养基的离心管中中，用滴管轻轻吹打混匀，800转/min，5分钟离心；弃去上清液，加入培养基，混匀再离心一次，弃液，加入4~5ml 培养基，混匀，移入培养瓶中

细胞换液

1.用旧液体轻轻冲洗培养瓶底，然后用滴管吸尽旧液（弃去）

2.加入PBS1~2ml，轻轻摇晃，然后用滴管吸尽旧液（弃去）

3.如果细胞液比较脏，可以重复步骤2

4.加入新培养基，轻轻摇匀，放入培养箱继续培养

细胞传代

1.用旧液体轻轻冲洗培养瓶底，然后用滴管吸尽旧液（弃去）

2.加入PBS1~2ml，轻轻摇晃，然后用滴管吸尽旧液（弃去）

3.加入约1~1.5ml胰酶，室温或培养箱中放置4~5分钟，直到所有贴壁细胞消化下来为止【判断方法：倒置相差显微镜观察，细胞变圆时就可以终止消化】

4.加入约1ml培养基（含有小牛血清）终止消化

5.用滴管吹洗一次，移入离心管, 800转/min，5分钟离心

6.加入培养基，吹打分散细胞，再根据分传细胞瓶数补加一定量的含血清的培养基，制成细胞悬液；分装至2~3个培养瓶中

7.放入培养箱进行培养

细胞计数

1.准备好显微镜、载玻片、盖玻片、血细胞计数板、吸管等仪器设备

2.按照“细胞传代”中讲述的方法制成细胞悬液

3.将细胞悬液取出若干，滴入血细胞计数板，注意不要有气泡进入

4.加样后静置2~3min后观察，数四角大格内的细胞总数。计数时应按照一定的路径，以免遗漏或重复。细胞压线时计上不计下，计左不计右，计数2~3次，取平均值

5. 细胞密度 = 四大格中细胞总数÷4 ×104 = 细胞数/ml悬液

细胞冻存

1. 重复“细胞传代”中的消化细胞的步骤，将细胞消化下来，转移至离心管800转/min，5分钟离心，弃液

2. 沉淀中加入冻存液，轻吹制成悬液

3. 分转到冻存管内，每个1~1.5ml

4. 将冻存管口封严

5.贴上标签，注明冻存时间、细胞种类及代数

6. 按下列顺序降温，并zui终冻存：室温→ 4℃ 20min → -20℃ 30min →-70℃冻存

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慧颖生物关于出售的污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果；细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，我们调查核实后予免费调换，不收取任何费用。

需要客户提供细胞培养说明、细胞操作处理方法、细胞质量问题反馈表;如果搞不清原因的，或者客户直接愿意支付购买价半价的费用直接复苏。

如用户收到细胞8-30天之内，因处理不当造成细胞死亡或污染，我公司将以五折优惠价重新提供一株原细胞。

慧颖生物科技（上海）有限公司位于嘉定区南翔众仁路399号运通星财富广场，由海外华侨和多名中科院博士组成的技术团队，主要致力于免疫学、分子生物学、病理、病理分子生物、代谢组学、生物化学技术在科研中的应用与推广，专业从事相关产品的引进、服务和研发。通过高度细分、*的服务平台，向广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产。

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