293XL-hTLR9细胞，人胚肾细胞

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产品名称：293XL-hTLR9细胞

中文名称：293XL-hTLR9细胞为稳定表达人TLR9基因的人胚肾细胞，来源于人胚肾

细胞形态：上皮样

生长状态：贴壁生长

培养基：DMEM 高糖90%, Fetal Bovine Serum 10%，Blasticidin 10μg/ml

培养条件：37℃ 5% CO2

消化条件：不可以使用胰酶进行消化。去培养基，加入2ml新鲜培养基后，反复吹打，使细胞分散成单个细胞，重新接种。

传化比例：1：5-1：10

换液时间：2-3天换液一次

冻存液比例：85%培养基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

冻存密度：3-5 ×10^6/管，液氮保存

293XL-hTLR9细胞，人胚肾细胞操作常见问题１：

培养液pH对细胞生长的影响有哪些？

由于大多数细胞适宜pH为7.2~7.4，偏离此范围对细胞将产生不良的影响。各种细胞对pH的要求也不*相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。

但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些，偏酸环境中更利于细胞生长。因此，我们在配制培养用液时，可把液体的pH稍微调得偏酸一些。培养基在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时，溶液的pH还会向上浮动0.2左右。

293XL-hTLR9细胞，人胚肾细胞操作常见问题２：

细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？

不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力zui强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。

培养细胞每次进行传代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶，以便于将含血清的培养基冲洗干净，这样就能大大提高消化液的消化能力。

细胞中心通常使用的消化液浓度为：

（1）０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

（2）０.２５％胰蛋白酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。

（3）0.25% 胰蛋白酶

    溶液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制。

多数细胞传代消化可使用０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ这种消化液。

293XL-hTLR9细胞，人胚肾细胞操作常见问题３：

培养细胞状态欠佳原因有哪些：

1、  培养基的新鲜程度：一般加入血清后的*培养基，2周内用完。否则血清有效成分失活，影响细胞培养。

         建议：*培养基一次不要配太多，200ml以下。或根据用量决定。

 2、  细胞外源微生物的污染：细胞不宜长期体外培养，因为外源微生物污染的几率大大提高。易发现和难发现的。影响细胞状态。

        建议：实验前冻存一批细胞，隔几个月重新复苏。即保证实验所用细胞代数*，又将外源污染的后果降到zui低。

3、  排除其他原因：如更换培养条件（血清、培养基等）；使用器皿的洁净程度；

HY0001  K562细胞，人慢性髓原白血病细胞株    1640  10%   悬浮    美国

HY0002  H128细胞，人小细胞肺癌细胞株    DMEM 10%    悬浮,集聚   美国

HY0003  H69细胞，人小细胞肺癌细胞株 DMEM 10%    悬浮    美国

HY0004  HS77细胞，人小细胞肺癌细胞株    DMEM 10%    悬浮    美国

HY0005  A549细胞，人肺腺癌细胞株    1640  10%   上皮样  美国

HY0006  LTEP-A2细胞，人肺腺癌细胞株 1640  10%   上皮样  中国

HY0007  SPC-A1细胞，人肺腺癌细胞株  1640  10%   上皮样  中国

HY0008  D6细胞，人肺腺癌细胞株  1640  10%   上皮样  美国

HY0009  LAX细胞，人肺腺癌细胞株 1640  10%   皮样    中国

HY0010  NCI-H460细胞，人大细胞肺癌细胞株    DMEM 10%    上皮样  中国

HY0011  95-D细胞，人高转移肺癌细胞株    1640  10%      

HY0012  Calu-3细胞，人肺腺癌细胞株  DMEM 10%       

HY0013  HCCLMS细胞，人肝转移癌细胞株    DMEM 10%    上皮样  中国

HY0014  SMMC-772细胞，人肝癌细胞株  DMEM 10%    上皮样  中国

HY0015  BEL-7402细胞，人肝癌细胞株  DMEM 10%    上皮样  中国

HY0016  BEL-7404细胞，人肝癌细胞株  DMEM 10%        中国

HY0017  BEL-7405细胞，人肝癌细胞株  DMEM 10%        中国

HY0018  QGY-7701细胞，人肝癌细胞株  DMEM 10%        中国

HY0019  QGY-7703细胞，人肝癌细胞株  DMEM 10%        中国

HY0020  QGY-Q3细胞，人肝癌细胞株    DMEM 10%    上皮样  中国

HY0021  HepG2细胞，人肝癌细胞株 DMEM 10%        中国

HY0022  Hep3B细胞，人肝癌细胞株 DMEM 10%        中国

HY0023  BGC-823细胞，人低分化胃腺癌细胞株   DMEM 10%        中国

HY0024  SGC-7901细胞，人胃癌细胞株  1640  10%   上皮样  中国

HY0025  ECA-109细胞，人食管癌细胞株 DMEM 10%       

HY0026  MNK-7细胞，人乳癌细胞株 1640  10%   上皮样  美国

HY0027  SK-BR-3细胞，人乳腺腺癌细胞株   1640  10%   上皮样 

HY0028  BT-474细胞，人乳癌细胞株    DMEM 10% insulin（0.2U/ml） 上皮样,呈片状

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