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RWPE-1细胞株RWPE-1细胞价格 慧颖细胞库提供传代 冻存细胞,存活率高,*,复苏周期短!慧颖提供400多种类细胞株细胞系、耐药株、原代细胞、热卖种类有:卵巢癌细胞、乳腺癌细胞、胃癌细胞、肺癌细胞、前列腺、舌鳞癌细胞、结肠癌细胞等,: !
细胞介绍:RWPE-1细胞为人正常前列腺上皮细胞,来源于人正常前列腺,中文名为人正常前列腺上皮细胞,正常的细胞形态为上皮样,贴壁生长。肿瘤抑制基因: p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人乳头瘤病毒的18(HPV-18)进行转化,建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 细胞株 [PubMed: 9214605]. 在三维Matrigel培养时,在雄激素作用下,RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时,RWPE。
培养基:这株细胞的基本培养基作为Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分: 角化细胞无血清培养基K-SFM,kit目录号17005-042。随kit提供这株细胞生长所需的两种添加剂(牛垂体提取物BPE及人重组表皮生长因子EGF)。 配制*生长培养基,需添加以下成分: 0.05 mg/ml BPE – 随K-SFM提供 5 ng/ml EGF -随K-SFM提供。K-SFM,BPE 0.05mg/ml,EGF 5ng/ml(Gibco试剂盒17005-042)。
培养条件:37℃ 5% CO2
消化条件:洗涤:不含Ca++/Mg++离子的D-PBS;消化:溶于D-PBS的0.05% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶液,消化5-10min,不能拍打培养皿, 需要静止自然消化;中和:0.1% 大豆胰蛋白酶抑制子或含2%FBS的D-PBS;离心125×g, 5~7min
传化比例:1:3-1:5
换液时间:2天换液一次
冻存液比例:85%培养基,10%FBS, 10% (v/v) DMSO
冻存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
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慧颖运输:短途运输问题不大。可是长途天热时,我们要做好相应的运输安全措施。活细胞的运输方法相对比较简单,a)将该瓶细胞装满培养基,这样做的目的是让所有细胞都始终有营养供给。b)用酒精擦拭培养瓶,瓶口用封口膜包好。c)细胞取回后,半量换液。冬天则是采用全血清包被细胞运输,细胞运输中处于休眠状态,收到细胞以后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后将小管细胞转移至T25培养瓶,加入5ml左右含FBS的培养基混匀,放入培养箱隔夜培养后查看细胞汇合度:若未超过80%汇合度,换液继续培养,根据情况传代或者冻存。若超过80%汇合度,可直接进行传代。
对于RWPE-1细胞株RWPE-1细胞价格贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。