MS1细胞|慧颖科研用|小鼠胰岛内皮细胞株

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产品名称：MS1细胞

细胞来源：小鼠胰岛内皮

生长状态：贴壁生长

细胞形态：上皮样

培养基：DMEM 95%, Fetal Bovine Serum 5%

培养条件：37℃ 5% CO2

消化条件：0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA 溶液，静止消化 5-10min

消化比例：1：4-1：8

换液时间：2-3 天换液一次

冻存液比例：85%培养基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

冻存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

MS1细胞|慧颖科研用|小鼠胰岛内皮细胞株 全国各地均可发货，全国统一价格

产品名称：MS1细胞

规格：70%-80%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶

特点：细胞代数为3-5代左右

包装：内层无菌自封袋；防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书

细胞来源：ATCC

货期：1-2周

运输方式：快递运输

售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真或致销售人员，我们将尽快为您解决。

MS1细胞|慧颖科研用|小鼠胰岛内皮细胞株细胞培养常见问题分析

细胞培养

1、冷冻管应如何解冻？

取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。

2、细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？

除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。

3、可否使用与原先培养条件不同之培养基？

不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。

4、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？

不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

5、何谓FBS, FCS, CS, HS ?

FBS （fetal bovine serum） 和FCS （fetal calf serum） 是相同的意思， 两者都是指胎牛血清， FCS 乃错误的使用字眼， 请不要再使用。CS （calf serum） 则是指小牛血清。HS （horseserum） 则是指马血清。

6、培养细胞时应使用5 % 或10% CO2？或根本没有影响？

一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作为pH 的缓冲系统， 而培养基中NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时，细胞培养时应使用10 % CO2；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时， 则应使用5 % CO2 培养细胞。

7、何时须更换培养基？

视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。

8、培养基中是否须添加抗生素？

除于特殊筛选系统中外， 一般正常培养状态下， 培养基中不应添加任何抗生素。

9、附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA 浓度？应如何处理？

一般使用之trypsin-EDTA 浓度为0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。*次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中， 保存于–20 ℃，避免反复冷冻解冻造成trypsin 之活性降低， 并可减少污染之机会。

10、悬浮性细胞应如何继代处理？

一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中， 稀释细胞浓度即可， 若培养液太多时， 可将培养角瓶口端稍微抬高， 直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶， 加入新鲜培养基稀释至适当浓度， 重复前述步骤即可。

11、欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？

欲回收动物细胞， 其离心速率一般为300xg （约1,000rpm），5 - 10 分钟， 过高之转速， 将造成细胞死亡。

12、细胞之接种密度为何？

依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因。

13、细胞冷冻培养基之成份为何？

动物细胞冷冻保存时zui常使用的冷冻培养基是含5 - 10 %DMSO （dimethyl sulfoxide） 和90 - 95 % 原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO 稀释时会放出大量热能， 故不可将DMSO 直接加入细胞液中， 必须使用前先行配制完成。

14、DMSO 之等级和无菌过滤之方式为何？

冷冻保存使用之DMSO 等级， 必须为Tissue culture grade之DMSO （如Sigma D2650）， 其本身即为无菌状况， *次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中， 保存于4°C， 避免反复冷冻解冻造成DMSO 之裂解而释出有害物质， 并可减少污

客户问题1：

刚刚收到细胞，贴壁少，密度低，状态不好

回答1：

因为运输过程的影响，细胞出现贴壁松动、脱落，是正常的。处理建议：把细胞放回培养箱培养，更换15%血清，脱落下来的细胞离心后种在新的培养瓶里面，也是用15%血清，一般养3-4天左右，传1-2代后，细胞即可逐渐恢复。

客户问题2：

消化传代后，细胞死亡多，不贴壁

回答2：

这种情况，基本上是客户在消化的时候，胰酶消化过度，造成细胞较严重的损伤。处理建议：根据胰酶实际使用效果，摸索一个*消化时间，严控消化过度；如果已经操作造成消化过度，把血清调高到15%，让存留的贴壁细胞生长起来，期间不要频繁换液，维持在3-4天更换一次培养基即可，等细胞密度超过50%以后，再隔天换液

客户问题3：

细胞培养中有黑点或者亮圆点

回答3：

要客户首先排除是否污染，如果这些黑点或者亮点是污染物，那么培养基会在1-2天内变浑浊，同时镜下可观察到这些黑点或者亮点呈爆发式生长。如果培养基不会浑浊排除污染，这些黑点就是细胞死亡后的碎片残渣，用PBS可以把大部分清洗掉。如果PBS清洗后还是有较多附着在瓶底的碎

收到细胞株应及时查看外包装有无破损，镜下观察有异常及时拍照发给相关负责人以便及时的帮您处理。

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