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产品名称:HCC4006细胞*人肺癌腺癌细胞株
细胞来源:美国ATCC
供应商:慧颖细胞库
包装方式:25T培养瓶或2ML离心管全血清包被
快递方式:免费送货上门
代数:3-5代
货期:1-2周
HCC4006细胞*人肺癌腺癌细胞株,若客户收到2ml小管细胞,冬季发货比较适合,收到细胞以后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后将小管细胞转移至T25培养瓶,加入5ml左右含FBS的培养基混匀,放入培养箱次夜培养后查看细胞汇合度:若未超过80%汇合度,换液继续培养,根据情况传代或者冻存。若超过80%汇合度,可直接进行传代。
哺乳动物细胞是在营养丰富的培养基中培养的,并且培养温度有利于几乎所有微生物的生长。尽管许多研究人员在培养基中加入抗生素或抗菌素,作为预防措施,但这并不能解决方法上的错误,反而掩盖了潜在的问题。如果可能的话,避免使用这些抗生素,不断改善无菌技术,来保持你的培养箱干净。
HCC4006细胞*人肺癌腺癌细胞株,生长培养基的PH值对细胞的增值和病毒或重组蛋白的生产均会产生影响。对于大部分鳞翅类昆虫细胞系,在PH值 6.0-6.4范围的大部分应用效果良好。培养鳞翅类昆虫细胞系时,培养基的zui适渗透压是 345-380mOsm/kg.。为保证可靠和持久的细胞培养方式,减少技术问题,保持PH值和渗透压在以上所列的范围之内。
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HCC4006细胞*人肺癌腺癌细胞株当重要的培养污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。
高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性,因而,做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。
1 在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。
2 分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,两性霉素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。
3 每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。
4 确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2-3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2-3代。
5 在无抗生素的培养基中培养细胞一代。
6 重复步骤4。
7 在无抗生素的培养基中培养4-6代,确定污染是否以已被消除。