大鼠胰岛β细胞瘤细胞，ATCC RIN-m5F细胞

大鼠胰岛β细胞瘤细胞，ATCC RIN-m5F细胞 简介：

产品名称：RIN-m5F细胞

中文名称：大鼠β胰岛素瘤细胞

来源：美国ATCC

形态特性：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

特征特性：该细胞是大鼠胰岛细胞RIN-m的克隆，分泌胰岛素及L型多巴脱羧酶，不产生生长激素抑制激素。

培养条件：RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

传代方法：1:3～1:6传代，每周换液2～3次

复苏周期：10个工作日

代数：3-5代

运送方式：联邦快递

安全性：所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。

大鼠胰岛β细胞瘤细胞，ATCC RIN-m5F细胞接收后的操作流程与注意事项

1.如果细胞为贴壁细胞，，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基，培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡，请及时实验室，技术人员会跟进解决。

2.贴壁细胞生长缓慢：适当提高血清浓度（zui高不能超过20%），或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养

3.生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养

  常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）：

1.吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml  0.25%胰酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在1-2min）

2.镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml *培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散

3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的*培养基，，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养

4.注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存

 特别注意：（如使用公共实验室或初次接触细胞培养，建议添加双抗培养）

1.收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间zui长不宜超过72小时）

2.贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育隔夜到第二天再做消化传代，请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养

3.如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并实验室。