MEF细胞

MEF细胞

上海慧颖生物常年供应大量细胞，涉及细胞有人正常细胞，人肿瘤细胞，动物正常细胞，动物肿瘤细胞。细胞种类较多，本展台无法一一体现，有意愿购买细胞的客户请及时和销售客服咨询是否有您需要的细胞。

MEF细胞

细胞培养中常见的污染情况总结如下:

常见的污染如下：

1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。

仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！

可在培养液中加相应的抗生素处理

2、霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，

用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。

CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。

其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。

预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境*消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作

3、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。

用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。

4、黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。

5、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。

6、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，zui终形成恶性循环。

污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等

关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中（不加细胞），37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长 就是操作的问题。

也可以在培养基中事先加入双抗（硫酸链霉素和氨苄青霉素）。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。

1、孵箱应定期用三氧机消毒 或者 紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水

2、超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素

3、超净台的风机不能过大，风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染

4、无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的氨水喷洒中和，约几小时即可进入操作。

MEF细胞 相关高品质细胞株细胞系主要有：

K562    1640  10%    慢性髓原白血病    悬浮   

H128*    DMEM 10%    小细胞肺癌    悬浮,集聚   

H69    DMEM 10%    小细胞肺癌    悬浮   

HS77    DMEM 10%    小细胞肺癌    悬浮   

A549    1640  10%    肺腺癌    上皮样   

LTEP-A2    1640  10%    肺腺癌    上皮样   

SPC-A1*    1640  10%    肺腺癌    上皮样   

D6    1640  10%    肺腺癌    上皮样    

LAX    1640  10%    肺腺癌    皮样   

NCI-H460    DMEM 10%    大细胞肺癌    上皮样   

95-D    1640  10%    高转移肺癌       

Calu-3    DMEM 10%    肺腺癌       

HCCLMS    DMEM 10%    肝转移癌    上皮样   

SMMC-7721*    DMEM 10%    肝癌    上皮样   

BEL-7402    DMEM 10%    肝癌    上皮样   

BEL-7404    DMEM 10%    肝癌       

BEL-7405    DMEM 10%    肝癌       

QGY-7701    DMEM 10%    肝癌       

QGY-7703    DMEM 10%    肝癌       

QGY-Q3*    DMEM 10%    肝癌    上皮样   

HepG2    DMEM 10%    肝癌       

Hep3B    DMEM 10%    肝癌       

BGC-823    DMEM 10%    低分化胃腺癌       

SGC-7901*    1640  10%    胃癌    上皮样   

ECA-109    DMEM 10%    食管癌       

MNK-7*    1640  10%    乳癌    上皮样   

SK-BR-3*    1640  10%    乳腺腺癌    上皮样   

BT-474    DMEM 10%insulin（0.2U/ml）    乳癌    上皮样,呈片状   

MCF-7*    1640/DMEM 10%     乳腺腺癌    上皮样   

ZR-75-1    1640  10%    乳癌    上皮样   

ZR-75-30    1640  10%    乳腺癌       

MDA-MB-231    DMEM 10%    乳癌    Adherent，Epithelial   

Bcap-37    DMEM 10%    乳腺癌       

MDA-MB-435S    DMEM 10%    乳腺管癌       

T47D    1640 10%Insulin (0.2U/ml)    乳腺管癌       

BT-20    1640  10%    乳癌       

HBL-100    DMEM 10%    乳腺细胞       

JEG    1640  10%    绒癌    上皮样   

JAR    1640  10%    绒癌    上皮样   

HeLa*    1640  10%    宫颈癌    上皮样   

HeLa-229    1640  10%    宫颈癌       

HO-8910    DMEM 10%    卵巢癌       

C200    1640  10%    卵巢癌       

HT-29*    1640 10%    结直肠癌    Adherent，epithelial   

Sw620    DMEM 10%    结肠癌       

LoVo    1640  10%    结肠腺癌    上皮样   

Ls-174-T    1640  10%    结肠腺癌       

HCT-8    1640  10%    回盲肠腺癌       

HCE-8962    1640  10%    盲肠未分化癌       

SHG-44    1640  10%    脑胶质瘤    上皮样   

U-251    1640  10%    脑星形胶质瘤       

SK-N-SH    1640  10%    脑星形胶质瘤       

CNE    1640  10%    鼻咽癌       

Jurkat    1640 10%    急性T细胞白血病    悬浮   

Hut102    1640  10%    人皮肤T细胞淋巴瘤    悬浮   

Hut-78    1640  10%    人皮肤T细胞淋巴瘤    悬浮   

HL-60*    1640  10%    人原髓细胞白血病    悬浮   

U937    1640  10%    组织细胞淋巴瘤       

Raji    1640  10%    Burkitt’s淋巴瘤       

Namalwa    1640  10%    Burkitt’s淋巴瘤       

A431    10%  F12    人表皮癌       

SH-SY5Y    MEM+F12（1:1）15%    人神经瘤细胞       

DU145*    1640 10%    前列腺癌    Adherent，epithelial   

PC-13    1640 10%    前列腺癌       

CL1    1640 10%    前列腺癌       

ME12    1640 10%    前列腺癌       

P69    1640 10%    前列腺癌        

Tca-8113    1640 10%    舌癌    上皮样   

KB    1640 10%    空腔表皮样癌       

Hep-2    1640 10%    喉表皮样癌       

ACC-2    1640 10%    腺样囊性癌       

ACC-3    1640 10%    腺样囊性癌       

THP-1    1640 10%    单核细胞瘤       

A375    1640 10%    恶性黑色素瘤       

T-24    1640 10%    膀胱变异细胞癌       

EJ    1640 10%    膀胱癌       

ScaBER    1640 10%    膀胱鳞癌       

PANC-1    DMEM 10%    胰腺癌       

Bxpc-3    DMEM 10%    胰腺腺癌       

EH-PAN1    DMEM+15%FBS    人原代胰腺癌        

MG-63    DMEM    骨肉瘤     贴壁生长    

U2OS    DMEM    骨肉瘤     贴壁生长    

HOS8603    DMEM(10%FBS)    骨肉瘤        

LUXL-1    IMDM    交质瘤       

LUXL-2    IMDM    交质瘤       

786-O        人肾透明细胞腺癌细胞        

A172        人脑胶质母细胞瘤细胞        

AGS        人胃癌细胞        

AZ-521        人胃癌细胞        

SW480        人结肠腺癌细胞        

CaCo-2        人结肠癌细胞        

HGC-27        人胃癌细胞        

Hs 746T        人胃癌细胞        

MGC80-3        人胃癌细胞        

MKN-45        人胃癌细胞        

NUGC-3        人胃癌细胞       

SNU-638        人胃癌细胞        

SNU-739        人肝癌细胞        

Tca8113        人舌鳞癌细胞        

U251        人脑胶质瘤细胞        

U-373MG        人脑神经胶质瘤细胞        

U-87 MG        人脑星形胶质母细胞瘤        

OPM-2        人骨髓瘤细胞        

NCI-H929        人骨髓瘤细胞        

U266        人骨髓瘤细胞       

CAL 27        人舌鳞癌细胞       

DLD-1        人结直肠腺癌上皮细胞       

5637        人膀胱癌细胞       

SK-OV-3        人卵巢癌细胞       

GBC-SD        人胆囊癌细胞       

MKN-28        人胃癌细胞       

NCI-N87        人胃癌细胞       

QCY-7703        人肝癌细胞       

HepG2.2.15        人肝癌细胞       

HuH7        人肝癌细胞