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ME-180细胞,人子宫颈表皮癌细胞,细胞株细胞系,ATCC细胞
产品名称:人子宫颈表皮癌细胞
代号:ME-180
来源:美国ATCC
形态特性:上皮细胞
生长特性:贴壁生长
细胞特性:这株细胞来源于一个细胞集落不规则没有显著角质化的侵染性鳞状细胞癌。 单层培养的细胞间可以观察到带状连接,也注意到有细胞质张力丝。 1970年发现支原体污染并去除。 肿瘤坏死因子(TNF)α抑制ME-180的生长。 这株细胞含有人乳头瘤病毒(HPV)DNA,与HPV-39的同源性高于HPV-18。
ME-180细胞培养:
一、 复苏
1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。
3. 把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。
4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。
5. 3天换一次培养基。
二、 传代
1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2. 把原有培养基吸掉。
3. 加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。
4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5. 用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。
6. 把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。
7. 倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。
8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。
三、 冻存
把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管中,静止几分钟,写明细胞种类,冻存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃第二天,然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制: 70%的*培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。
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